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对虾白斑综合症病毒(WSSV)蛋白对对虾免疫相关基因表达的调控

对虾白斑综合症病毒(WSSV)蛋白对对虾免疫相关基因表达的调控
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  • 批准号:30800857
  • 批准年度: 2008年
  • 学科分类:水产免疫生物学(C190601) |
  • 项目负责人:王蔚
  • 负责人职称:副研究员
  • 依托单位:国家海洋局第三海洋研究所
  • 资助金额:22万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2009年01月01日 至 2011年12月31日
  • 中文关键词: 对虾白斑综合症;(WSSV);蛋白;对虾;免疫
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

对虾是我国海水养殖的主要对象,但是深受WSSV等病原的巨大威胁。本实验室以往研究发现,对虾的小G蛋白(Rab和Ran)、Caspase及QM蛋白分别在对虾的三个主要免疫反应即细胞吞噬、细胞凋亡和酚氧化酶原系统起重要作用。因此,在原有的基础上本项目进一步研究WSSV病毒蛋白对这几个对虾免疫相关基因的调控。首先利用本实验室前期工作中初步建立的对虾BAC文库获得对虾免疫相关基因的表达调控DNA序列,并在昆虫细胞中验证其启动子功能;然后利用免疫相关基因的调控DNA筛选与之结合的WSSV病毒蛋白,并验证WSSV病毒蛋白对对虾免疫相关基因的调控作用;最后就WSSV病毒蛋白与对虾免疫相关基因互作在对虾免疫中的作用进行研究,以期在分子水平上深化对病毒与宿主相互作用的机制的了解,这对于培育抗病养殖品种、有效防治养殖病害的发生具有重要意义,同时为海洋无脊椎动物的分子免疫学和免疫遗传学研究提供借鉴。

结题摘要

对虾是我国海水养殖的主要对象,但是深受WSSV等病原的巨大威胁,至今没有有效的防治方法。本项目从对虾的四个重要免疫相关基因Rab和Ran、Caspase以及QM出发,研究WSSV病毒蛋白对对虾免疫应答的调控。首先采用染色体步行的方法,获得Rab和Ran、Caspase和QM基因的5'端上游序列,长度分别为180bp、827bp、678bp和307bp。将获得的序列在昆虫细胞中验证其启动子功能,发现Ran和Caspase的上游序列有启动子功能。将Ran和Caspase的调控区DNA进行亲和素标记,然后与链霉亲和素修饰的磁珠结合,通过下拉发现Ran基因的启动子序列与对虾的Actin和Ran蛋白结合,Caspase的启动子序列能与病毒的VP38 和VP41B蛋白结合。通过荧光素酶报告基因发现VP38和VP41B对PjCaspase启动子分别有抑制和激活作用,而对VP38和VP41B基因进行过量表达和RNAi抑制后,发现WSSV感染后这两个WSSV蛋白对对虾血细胞凋亡有调控作用。本项目研究结果为无脊椎动物的免疫机制增添了新的内容,也为对虾病害防治提供了基础。

评估说明

    国家自然科学基金项目“对虾白斑综合症病毒(WSSV)蛋白对对虾免疫相关基因表达的调控”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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