中文摘要
一种导致锯缘青蟹大规模死亡的暴发病陆续在中国东海岸养殖场暴发流行。前期从病蟹的组织器官发现大量的球形病毒粒子,病毒的形态结构类似于已报道的水生呼肠孤病毒。为一步弄清该病毒的生物学特性,申请者拟进行病毒的鉴定、病毒的全长cDNA文库和实验模型构建、RNA聚合酶基因克隆,以及建立病原的核酸检测技术。
结题摘要
近年来,一种由呼肠孤样病毒引起的锯缘青蟹疾病陆续在我国东部沿海养殖场暴发与流行,造成了巨大的经济损失。针对上述疾病,项目组开展了疾病病原确证,病原基因组解析,病原繁殖生物体系构建和病原检测技术建立等方面的研究工作,得到结果如下:发现锯缘青蟹呼肠孤病毒(SsRV)感染可导致青蟹多组织器官的病理学及细胞病理学变化;确证了SsRV是锯缘青蟹疾病的主要病原;证实了SsRV病毒为12节段双链(ds)RNA病毒,其基因图谱类型为1/5/6;克隆获得了SsRV全基因组序列;基于基因组节段序列同源性分析,RdRp分子进化分析,基因组的末端特殊保守序列,我们建议SsRV属于呼肠孤病毒科的一个新属;证明了SsRV病毒能够在克氏原螯虾体内有效增殖,从而成功构建了SsRV繁殖的克氏原螯虾生物系统;基于SsRV的RdRp基因序列,建立了特异、快速、灵敏、简便的SsVR病毒检测的RT-LAMP技术;开展了SsRV宿主范围调查,发现三疣梭子蟹、脊尾白虾、缢蛏、菲律宾蛤仔、沟螺、贻贝、口虾蛄、泥蚶皆可携带SsRV病毒。
