组织工程皮肤（TES）临床应用受限的主要原因是血管化及抗感染能力较差。在成功构建以脱细胞真皮（ADM）为支架的TES的基础上，分别克隆人β防御素3（hBD-3）及血管内皮生长因子（VEGF）基因构建真核表达载体，并分别将其导入人皮肤成纤维细胞中，经筛选获得hBD-3和VEGF基因稳定转染的成纤维细胞株作为组织工程"种子细胞"，从而与人角质形成细胞复合构建具有较强血管化能力及抗感染能力的新型TES。其意义在于：分别建立hBD-3、VEGF基因强化的"种子细胞"株后，可根据临床需要通过调整二者的接种比例构建新型TES，使其在一定时间内稳定表达并分泌具有强烈、广谱杀伤病原菌作用的hBD-3蛋白和强烈促血管形成作用的VEGF蛋白，从而在移植早期有针对性的增强TES的非特异性免疫功能和血管化能力，提高TES在烧伤、感染创面、慢性溃疡等不同皮肤缺损创面修复中的成活率，为扩大TES的应用范围探索新方法。

通过提取正常儿童皮肤总RNA、扩增hVEGF165和hBD-3基因，并将其分别连接至真核表达载体pcDNA3，PCR、酶切和测序鉴定正确后，脂质体法转染人皮肤成纤维细胞（SFb）获得SFb/hVEGF165和SFb/hBD3。并以此分别构建基因强化的组织工程皮肤hVEGF165-TES和/BD3-TES，观察其表达目的蛋白的能力及进行裸鼠移植实验观察其促血管生成能力和抑菌能力。经过实验，成功构建pcDNA3/hVEGF165和pcDNA3/hBD3真核表达质粒，实现了hVEGF165和hBD3基因在人皮肤成纤维细胞中稳定表达。体外实验证实SFb/hVEGF165和SFb/hBD3均可稳定表达目的蛋白表达，且表达的hBD3具有抑菌活性；裸鼠移植实验证实hVEGF165-TES可促进移植区新生血管形成，但hBD3-TES的体内抗菌活性实验未取得预期结果。本研究取得的成果主要是成功构建了hVEGF165和hBD-3基因强化的皮肤成纤维细胞系，并证实以其构建的hVEGF165-TES和hBD3-TES具有促进血管生成的作用和体外抑菌活性，为进一步开展基因强化的TES研究奠定了基础。