利用植物双元表达载体pPZP100和pGA643,以及申请者自行克隆的甜瓜ACC合成酶基因cDNA、ACC氧化酶基因cDNA、果实特异性表达黄瓜素基因启动子，分别构建4种表达载体，用限制性内切酶切割，电泳分离和制备无载体、无选择标记基因、只含有启动子、目的基因、终止子和LB/RB序列的目的DNA片段。应用花粉管通道法将目的DNA片段导入内蒙古特产的优良甜瓜品种河套蜜瓜，获得T0代转化种子，播种于田间，进行自交，根据分子检测结果和转基因果实的耐贮藏表型筛选转基因植株，收集耐贮藏果实，采集T1代种子，播种于田间，自交授粉，继续评价果实耐贮性，并根据分子检测和表型分离情况，选择纯合株系，采集T2代种子，进行外源基因拷贝数测定。为进一步培育无载体、无选择标记基因的更具有生物安全性的转基因耐贮藏河套蜜瓜新品种创造条件，可见本项研究具有重要应用前景。

以双元载体pPZP221为最初载体，去掉载体上的庆大霉素抗性基因，获得载体pPZP201，用黄瓜素基因启动子替换pPZP201的35S启动子，获得pPZPC201。将甜瓜ACC合成酶基因ACS1和ACC氧化酶基因ACO1 cDNA片段分别反向构建到pPZP201和pPZPC201中，获得4种表达载体pPZPAS、pPZPCAS、pPZPAO、pPZPCAO。同时以植物RNAi表达载体pART27为最初载体，去掉载体上的卡那霉素抗性基因，经过RNAi克隆载体pHannibal，最终构建获得ACO1和 ACO1的RNAi表达载体pAS、pCAS、pAO、pCAO。分别用PsyⅠ/PaeⅠ和SalⅠ酶切上述表达载体，应用花粉管通道法将目的DNA片段导入甜瓜品种河套蜜瓜，获得T0代转化种子，进行连续两代自交选育，获得了5个耐贮藏品系，其中转反义ACO1基因株系2个，转RNAi ACO1基因株系3个，转基因果实在常温下可贮藏2个月，而非转基因对照果实贮藏期仅1周左右。转基因果实的乙烯合成量为非转基因对照果实乙烯合成量的1-5%左右。在贮藏期间，转基因果实硬度基本保持不变、不过熟和不霉变。