中文摘要
申请人主要工作成绩:主要从事鱼类早期发育分子生物学研究,首次发现鲑鱼的雄个体中存在一个特有的生长激素,该激素在鲑 鱼早期性别鉴定中有重要作用,此项技术已获美国专利;在国际上首次利用"全鱼"基因进行转基因研究, 成功地培育出生长速度增长4-5倍的超级鲑鱼;在鱼类骨骼肌发育机制研究中,发现斑马鱼骨骼肌由快、慢 肌组成,快、慢肌细胞产生与分化是由不同生长因子所调控,生长因子HH对慢肌发育起了决定的诱导作用;从斑马鱼和种经济鱼类中分离出三种肌肉发育调控基因,研究了其肌肉特异表达的分子机制;建立了 一个简单而灵敏的观测骨骼发育的方法;建立FSTN基因的转基因斑马鱼模型,分析转基因鱼子代中FSTN基因的表达;分析FSTN和MSTN 前体对成肌基因表达和肌细胞增殖的影响;比较分析肌肉调控因子在斑马鱼和金头鲷中对肌肉细胞增殖的效应,为建立人工调控MSTN和FSTN基因表达培育肌肉丰满型养殖鱼类技术打基础。
结题摘要
在本研究中,我们通过研究金头鲷myogenin和Follistatin基因分析鱼类肌肉生长调控因子及其调控作用机理。克隆了金头鲷的myogenin基因的基因组及cDNA序列,并通过原位杂交及RT-PCR分析了其时空表达;同时在斑马鱼中分析了其启动子活性。结果发现金头鲷的myogenin和其它物种的myogenin非常保守,并且在骨骼肌中特异表达;其启动子中的-550 bp到-220 bp之间含有调控肌肉特异性表达的元件,且可以跨物种发挥作用。克隆了金头鲷的Follistatin基因并分析了其表达,同时在斑马鱼中通过转基因分析Follistatin基因对肌肉生长的调控作用。实验表明金头鲷的Follistatin和其它物种的Follistatin非常保守;其在胚胎及成体的肌肉中表达;转Follistatin基因斑马鱼过表达Follistatin却没有促进肌肉生长,反而出现转基因斑马鱼比正常的要小;另外转基因F1代不能产生F2代,这表明Follstatin参与了繁殖发育。
