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细胞膜相关蛋白新基因dystrotelin在氧化应激损伤心肌细胞模型中的变化及其机制研究

细胞膜相关蛋白新基因dystrotelin在氧化应激损伤心肌细胞模型中的变化及其机制研究
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  • 批准号:30800550
  • 批准年度: 2008年
  • 学科分类:细胞膜与细胞器(C0701) |
  • 项目负责人:谭斯品
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:中南大学
  • 资助金额:22万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2009年01月01日 至 2011年12月31日
  • 中文关键词: 细胞膜;蛋白;dystrotelin;氧化应激;心肌
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

从mRNA和蛋白质水平阐明新克隆的细胞膜相关蛋白,dystrophin基因家族新成员dystrotelin在氧化应激损伤的心肌细胞模型,大鼠心肌缺血-再灌损伤模型中的时空表达模式;采用基因转染,反义寡核苷酸技术来探讨Dyt的过表达/表达抑制对心肌细胞抗损伤的影响及其量效关系;构建Dyt绿色荧光表达载体,观察该荧光蛋白在正常/应激状态下的心肌细胞的亚细胞定位;采用酵母双杂交系统,亲和层析,免疫共沉淀,免疫荧光方法筛选出Dyt在正常/应激,过表达/表达抑制状态下结合的蛋白,分析它们的生物学功能。开展本研究可望阐明新的细胞膜相关蛋白Dyt在心肌细胞损伤过程的变化和其可能的抗心肌损伤的机制。并期望进一步揭示以dystrophin为代表的细胞膜相关蛋白抗心肌损伤的分子机制,为心肌细胞抗损伤的防治和心肌抗损伤的治疗提供新线索和新思路。

结题摘要

Dystrotelin是课题组在研究dystrophin基因家族时克隆的一个新基因,使用realtime-RT-PCR,获得dystrotelin的基因表达谱,证实该基因在大脑和心脏中有高表达,组织进行免疫组化结果显示:dystrotelin 蛋白在骨骼肌神经肌肉接头间隙处呈高表达。不同缺血时间的小鼠心肌组织基因和蛋白表达结果显示:蛋白随着缺血时间的延长呈现进行性下降;增加/减少dystrotelin在H9C2细胞的表达量可减少/增加该细胞于氧化应激状态的死亡率,证实该基因具有心肌保护作用。构建了Dystrotelin氨基与羧基端的诱饵质粒,使用酵母双杂交,获得相互作用蛋白Rabaptin5,构建dystrophin羧基端诱饵质粒,运用酵母双杂交,获得相互作用蛋白myomegalin.

评估说明

    国家自然科学基金项目“细胞膜相关蛋白新基因dystrotelin在氧化应激损伤心肌细胞模型中的变化及其机制研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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