中文摘要
血吸虫病是一种严重危害公众健康的世界性分布的人兽共患寄生虫病,我国的血吸虫病主要流行于长江流域及以南的12个省(市、区),受威胁人群达1亿。经过过去半个多世纪的吡喹酮化疗,日本血吸虫的感染人数降低了90%。血吸虫病流行程度降低后,要求有更灵敏的方法用于血吸虫病的诊断。因此,建立特异性强、敏感性高,且操作简便、费用低廉,并能大规模应用于临床诊断和基层筛查的日本血吸虫病检测方法仍需进行不断探索研究。本项目将已制备的Sj23DNA突变体进行原核表达,获得新的Sj23突变体重组抗原,利用此抗原与纳米磁微粒进行偶联,拟发展一种基于纳米磁微粒作为载体的用于日本血吸虫病抗体检测的磁分离酶联免疫分析方法,为日本血吸虫病的检测诊断提供一种新方法。
结题摘要
磁分离酶联免疫分析法(MEIA)是一种将磁分离和酶联免疫分析技术相结合,实现对抗原或抗体进行测定的方法。本研究对偶联条件进行了优化,通过条件优化初步建立了用于人血清中日本血吸虫抗体检测的磁分离酶联免疫分析法(MEIA)。与ELISA法相比,MEIA法具有更好的灵敏度和精确度。应用优化的反应条件,将SEA-MEIA方法运用于实际样品的检测,并与IHA,DDIA法比较。结果显示:MEIA的假阴性率(0.97%)明显低于IHA(37.04%)及DDIA(27.09%),而假阳性率(19.12%)与IHA(15.49%)及DDIA(26.24%)相差不大,MEIA的调整一致性及约登指数均高于IHA及DDIA,是一种有前景的免疫分析方法。在已优化条件的基础上,基于SEA及重组抗原Sj26的MEIA法检测低密度感染日本血吸虫病血清,并与经典的检测方法ELISA比较。实验结果表明SEA-MEIA法比ELISA法更敏感,更可靠。rSj26-MEIA法与ELISA法具有相同的诊断敏感性,并且具有较好的诊断特异性和化疗评估价值。
