黑化包被反应是蚊抗疟原虫感染的重要天然免疫机制。目前认为，丝氨酸蛋白酶激活前酚氧化酶（PPO）是诱发黑化包被反应发生的关键步骤。而在丝氨酸蛋白酶激活PPO的过程中需要多个辅因子的参与，且这些辅因子可能在PPO激活过程中起着重要作用。因此，筛选和鉴别这些辅因子将有利于进一步阐明黑化包被反应的发生机制。本项目拟在本实验室已成功克隆并鉴定大劣按蚊PPO4功能的基础上，通过RNAi进一步鉴定其它本室已克隆的PPO分子的功能；并利用蛋白质相互作用组学技术等研究方法，以有作用的PPO分子为诱饵蛋白，筛选和鉴定PPO活化相关辅因子。本研究将进一步阐明大劣按蚊抗约氏疟原虫黑化包被反应的作用机制，明确丝氨酸蛋白酶级联反应的相关分子，为下一步疟疾阻断性疫苗的研制奠定理论基础。

黑化包被反应是蚊抗疟原虫感染的重要天然免疫机制，丝氨酸蛋白酶级联反应是黑化包被反应中的重要机制；其中前酚氧化酶（PPO）是诱发黑化包被反应发生的关键分子，是丝氨酸蛋白酶级联反应中的下游分子。目前，PPO在蚊抗疟原虫感染中的作用虽已得以部分证实，但在PPO是否参与蚊对疟原虫的杀伤机制上仍存在争议，且黑化包被反应的中上游关键分子尚不清楚，其机制也尚不明确。本项目在已成功克隆多个大劣按蚊PPO分子并进行了部分功能研究的基础上，通过RNAi、蛋白质学技术等研究方法，对在蚊抗疟原虫感染中起重要作用的大劣按蚊PPO4分子进行了功能鉴定，并筛选和鉴定了其它黑化相关蛋白（如丝氨酸蛋白酶和TEP1），对这些相关蛋白的功能进行了研究。本课题进一步阐明了大劣按蚊抗约氏疟原虫黑化包被反应的作用机制，明确丝氨酸蛋白酶级联反应的相关分子，为下一步疟疾阻断性疫苗的研制奠定理论基础。