喉癌是威胁人类健康的重大疾病，由于其发生部位的特异性，在临床治疗中存在一定难度，治愈率较低，生物治疗技术的出现为喉癌患者带来了新希望。Survivin基因是一种只高表达于人喉癌细胞而不表达于周围正常组织的凋亡抑制蛋白，该蛋白的表达与肿瘤治疗的耐受性、患者的预后和生存率都密切相关，其作用是通过作用于信号末端Caspase通路进而抑制喉癌细胞凋亡和促进癌细胞增殖，干预其表达对喉癌治疗有重要意义。RNA干扰技术是以碱基配对的方式在转录后水平特异性抑制基因表达，目前RNA干扰的难点在于靶细胞的转染效率较低以及靶向性不强，本研究拟在前期工作的基础上设计靶向的针对survivin基因的纳米载体/siRNA，提高转染效率，并通过体内外模型观察该质粒转染后对喉癌细胞的促凋亡效应，以期达到消除喉癌的效果，从而为临床喉癌的生物学治疗探索一条新的有效途径。

该项目研究构建包裹针对凋亡抑制基因survivin的siRNA干扰质粒片断的纳米壳聚糖微粒，观察其对转染喉上皮细胞Hep-2细胞后沉默survivin基因的表达效应。筛选获得了针对survivin基因的siRNA有效干扰片断pgensil/sur1、pgensil/sur2、pgensil/sur3，验证其具有一定干扰活性；制备了具有包裹siRNA干扰质粒的壳聚糖纳米微粒- - 壳聚糖/siRNA，壳聚糖载药微球的粒径大约在80-100nm，微球的形态成球形；质粒浓度为100μg/ml时包封率最高，为92.8％；通过比较纳米壳聚糖/siRNA微球、脂质体转染效率，实验结果证明构建的纳米微粒能有效转染质粒进入细胞。研究结果显示：构建的纳米壳聚糖微球具有转染siRNA的效能，能有效增强干扰质粒沉默目标基因survivin的能力。