中文摘要
牙周组织再生是牙周病治疗的理想愈合方式,而目前引导组织再生等众多临床治疗技术尚不能达到牙周组织完全再生。牙周再生是一个十分复杂的,需要多种细胞类型,多种信号系统参与和调控的过程,包括多种细胞、系统激素、细胞因子、基质蛋白的介入和相互作用。将釉基质蛋白联合骨髓基质细胞用于牙周组织工程技术为修复牙周缺损促进牙周再生提供了新的思路,而釉原蛋白是釉基质蛋白中的主要活性成分,但釉原蛋白基因修饰骨髓基质细胞促进牙周再生的方法和机理的研究均尚未见报道。.本课题拟把釉原蛋白(Am)基因治疗与组织工程方法相结合,采用人骨髓基质细胞作为组织工程的种子细胞,同时作为Ex vivo基因治疗的靶细胞,首次采用腺病毒载体构建Am基因修饰的骨髓基质细胞,并利用基因芯片等技术深入研究其机理,以期为牙周再生提供更为理想的方法,为釉基质蛋白的深入研究和在临床组织工程技术中的应用奠定基础。
结题摘要
牙周组织再生是一个十分复杂,需要多细胞、多信号系统参与和调控的过程。将釉基质蛋白联合骨髓基质细胞用于牙周组织工程为促进牙周再生提供了新思路,釉原蛋白是EMPs中的主要活性成分,由Am基因修饰BMSCs促进牙周再生的方法和机理的研究均未见报道。本课题在EMPs对人BMSCs生物学特性及作用机制研究的基础上,将基因治疗与组织工程相结合,首次采用慢病毒载体构建Am基因修饰的人BMSCs,利用基因芯片深入研究其机理,并在裸鼠体内观察Am基因修饰的BMSCs与牙根片共培养时异位成骨和牙骨质的能力。研究发现EMPs和转导Am基因均能促进人BMSCs的增殖,但对分化的作用不完全一致。基因芯片筛选出差异表达基因1715项,差异基因涉及细胞增殖分化、细胞周期、信号转导、转录、细胞受体、免疫和代谢等功能基因。hAm基因修饰的hBMSCs在牙根片表面促进新生钙化物的形成,但其作用未达到与提取的天然EMPs同等的程度。本研究对Am基因和EMPs促进牙周再生进行了较系统的研究,首次将Am基因重组慢病毒引入牙周基因治疗,以期为牙周再生探索更理想的方法,为EMPs的深入研究和在临床组织工程技术中的应用潜能奠定基础。
