细菌的耐药问题日益严重，多种耐药基因控制细菌耐药性的形成与转移，其中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因在革兰阴性菌β-内酰胺类耐药中的作用最为显著，导致细菌对这类临床使用最广泛的抗生素产生耐药特别是多重耐药。.ESBLs基因位于质粒上，是由质粒或染色体上普通的β-内酰胺酶基因演化而来。肺炎克雷伯菌是临床最常见的产生ESBLs细菌，我们发现，肺炎克雷伯菌染色体上的β-内酰胺酶基因（blaSHV）具有差异表达,并显著影响细菌的耐药表型，但ESBLs基因的差异表达情况尚不清楚。本项目通过制备携带不同ESBLs基因的接合子，分析接合子的耐药性特点以及耐药质粒的均一性、产ESBLs情况、mRNA表达、启动子同源性和强度等，探讨ESBLs基因差异表达的情况及其分子机制，为建立新的联合用药策略（包括：①控制耐药基因表达；②抗菌药物使用）、阐明细菌耐药多样性的遗传基础提供依据。

目前，细菌耐药广泛播散，已成为感染治疗领域的严重问题。加强耐药监测，研究耐药机制并探索新的治疗策略，对控制和延缓细菌耐药具有重要意义。在定期收集的肺炎克雷伯菌中，明确主要耐药机制和优势基因型；发现细菌以对β-内酰胺类和喹诺酮类抗生素耐药最为常见。通过研究相关耐药基因的存在和耐药表型间的关系，发现敏感株中亦有耐药基因的存在，其中β-内酰胺类耐药基因在转录水平具有差异表达现象，并决定细菌对抗生素的敏感性。发现细菌产生β-内酰胺药物钝化酶和喹诺酮作用靶位变异为耐药的主要机制，并发现了新的耐药突变位点；明确了细菌喹诺酮耐药中必须的gyrA基因变异类型，排除了无关的变异类型。并在上述基础上建立了在耐药菌株中通过控制耐药基因表达改变细菌对抗生素的敏感性而协同抗生素作用的耐药性细菌控制策略。此外，本研究检测了耐药菌株和非耐药菌株中耐药基因启动子区的变异，发现启动子区未出现以往文献研究发现的变异情况,排除了启动子变异在耐药基因差异表达中的作用。同时建立了菌株资料库以及研究细菌耐药和致病性的技术平台，包含耐药表型和基因型、耐药机制、细菌粘附和侵入等研究技术，为进一步开展细菌耐药性和致病性研究等提供支