TCR CDR3谱型能很好地反映感染、自身免疫、肿瘤等T细胞的应答和耐受情况，近年来证实HFRS外周血中存在特异的T细胞应答，但未见对其机制和应用的深一步研究报道。本项目在前期HFRS的诊断、HFRS易感性和HLA的关系，HFRS疫苗接种后的免疫应答的基础上，建立免疫谱型分析技术，监测HFRS疫苗接种者及HFRS患者TCR α和TCRβCDR3的变化，选取单克隆、寡克隆或频率变化显著T细胞的TCR AV、TCR BV家族进行测序，探讨HFRS疫苗接种和病毒感染后TCR漂移过程和机制，初步建立起HFRS相应的TCR αβCDR3谱系漂移库；并拟采用生物信息学分析和四聚体技术初步探讨诱导T细胞活化的HFRS病毒抗原表位。项目的预期结果将为HFRS免疫发病机制、T淋巴细胞个性化生物治疗、病毒的CTL表位疫苗提供基础，同时本项目将为T淋巴细胞相关的疾病研究提供新的方法和手段。

本项目按研究计划执行，主要探讨HFRS患者和HFRS疫苗接种者外周血TCR alpha/betaCDR3谱系特征，在前一个项目（30360099）对HFRS易感性和HLA关系等的研究基础上，本项目主要完成的实验研究内容：(1)在实验室建立起监测人TCR alpha CDR3 谱系的荧光定量溶解曲线分析技术和毛细管电泳激光扫描DNA片断分析技术，并初步在正常人和肿瘤、感染等临床样本中应用；(2)项目完成了15例临床HFRS患者外周血淋巴细胞TCR alpha/beta 链CDR3谱系的监测，对异常率、CDR3区基因和氨基酸组成等进行了较详细的分析，监测到的部分呈单峰表现家族TCR CDR3基因和氨基酸序列实现数据共享，为进一步研究HFRS患者的T细胞应答和临床HFRS患者的个体化治疗等提供方法和基础；(3) 项目完成了10例HFRS疫苗志愿接种者HLA的检测, 接种前、接种后2个月 、接种后6个月 PBMC的采集，CD4和CD8细胞的分选，CD4和CD8细胞TCR beta 链CDR3谱系的监测及和HLA的相关性等分析，为HFRS病毒性T细胞表位疫苗的研究提供了较好的基础。