肿瘤相关巨噬细胞(TAMs) 是肿瘤细胞运动、侵袭和转移的协同分子，能促进肿瘤新生血管的形成、细胞外基质的破坏和重塑，诱导机体对肿瘤细胞免疫抑制，与肿瘤细胞的直接联系导致肿瘤细胞进入血管内壁并产生转移性播散，是肿瘤进展过程中一个非常关键的中心环节。本项目拟首先对BALB/c小鼠4T1乳腺癌细胞分离的M2巨噬细胞进行基因表达谱分析，以分离和鉴定TAMs新型特异的分子标志物、研究这些分子标志物胞内信号传导通路，其次在体内外模型中用生物学功能和形态学实验分析TAMs表达新型标记物后对肿瘤基质浸润、转移以及肿瘤血管生成的影响；并进一步在小鼠4T1乳腺癌细胞模型中，用DNA疫苗和小分子抑制物特异靶向TAMs表达新型分子标志物，封闭分子标志物胞内传导通路的关键信号，评价抗肿瘤疗效；从正反两方面系统验证TAMs新型分子标志物作为基因治疗靶点药物的有效性和可行性。

肿瘤细胞与TME中的TAMs的相互作用在促进肿瘤细胞侵袭和进展中起关键作用。本研究首先证实小鼠乳腺癌细胞和肿瘤相关性巨噬细胞改建的肿瘤微环境，可上调Fra-1的表达，进而启动激活IL-6/JAK/Stat3信号通路，导致肿瘤细胞中MMP9、VEGF 和 TGF-β的表达增加，并且促进了肿瘤侵袭和进展。进一步通过siRNA 敲除Fra-1基因，证实其在小鼠乳腺癌模型中可显著抑制肿瘤的侵袭，血管生成和转移。其次，证实在4T1转移性乳腺癌小鼠模型中肿瘤相关成纤维细胞对肿瘤微环境中的免疫分化起关键作用。通过pFap疫苗对肿瘤相关成纤维细胞的消除，可改变免疫微环境，使Th2细胞向Th1细胞转变。这种转变表现为IL2和IL7的表达增加，抑制TAMs, MDSCs, Tregs的招募，减少肿瘤血管和淋巴管的生成。此外，疫苗接种能明显增强阿霉素的抗转移作用，增强对IL6 和 IL4表达的抑制，同时还能增加对DCs 和 CD8+T 细胞的招募。联合治疗还能减少肿瘤相关的Vegf, Pdgfc和GM-CSF 的表达。我们的研究证实Fra-1基因和肿瘤相关成纤维细胞可作为乳腺癌治疗的有效靶位。