中文摘要
猪内源性反转录病毒是猪-人异种移植、猪源制品与生物活性材料中最受关注的病原体,目前其病原性危害尚不明确。本项目是在建立中国特有小型猪内源性反转录病毒(PERV)体外细胞感染模型的基础上,进一步筛选感染较高病毒滴度嗜人性PERV的人源细胞,运用比较蛋白质组学方法分析病毒感染人源细胞后的蛋白质表达谱变化,获得蛋白质差异表达谱,研究其分子效应及潜在的病理作用。同时,结合功能蛋白质组学研究方法和技术手段,揭示嗜人性PERV在人源细胞中的分子效应机制。其意义是:蛋白质差异表达谱的获得对于嗜人性PERV的体外病原安全性评价具有重要意义,将有助于揭示嗜人性PERV的潜在病理作用;嗜人性PERV分子效应机制的研究,可进一步阐明嗜人性PERV的生物学特性和潜在病原性危害;此外,本项目对我国小型猪资源的开发利用同样具有重要意义。
结题摘要
本研究探索了嗜人性PERV感染人源细胞后的分子效应,该研究既有助于筛选优良的异种移植供体,也有利于深入进行异种移植的病原安全性评价。主要研究结果包括以下几个方面:(1)、筛选得到具有较高反转录酶活性的嗜人性PERV感染的人源细胞;(2)、建立了嗜人性PERV感染HEK293细胞后的双向电泳差异表达谱;(3)、利用质谱技术分析鉴定差异蛋白质,共鉴定出10个蛋白点;(4)、对比实时定量RT-PCR、Western Blot验证,与蛋白质组学分析结果相一致,这些差异蛋白参与信号转导、细胞凋亡、蛋白合成等生命过程,其中有数种蛋白与肿瘤的发生发展有关。该研究结果有望为深入研究嗜人性PERV与人源细胞的相互作用及PERV感染后的分子效应等提供一定的线索,也提示了PERV感染后可能会对细胞的生长、生理功能等造成影响,甚至存在潜在的致病性。通过本课题研究,培养研究生4名,发表SCI收录论文1篇,国内核心期刊论文2篇,正在整理的英文论文1篇。做特邀/大会报告3次。
