由猪流感病毒引起的猪流感是危害当前养猪业的重要疫病。对病毒的NA基因进行序列分析发现，在NA基因茎部存在多个氨基酸的缺失，而且氨基酸缺失的位置和数量均有较大的差异。我们将NA基因划分为5种不同"茎部-Motif"的基因型。猪流感病毒的NA基因在进化过程中选择不同的"茎部-Motif"对HA-NA活性平衡、病毒复制和致病性等有何影响，目前还不得而知。2000年后分离的病毒中NS1基因真核转录启动因子（eIF4GI）结合区内出现5个氨基酸的缺失（第80-84位），5氨基酸缺失的生物学意义及eIF4GI结合区进一步缺失截短对猪流感病毒分子进化、复制及致病性的影响值得深入研究。本研究拟对以上基因区域进行定点突变、缺失和插入等修饰，利用反向遗传操作技术构建猪流感病毒突变株。通过对突变毒株间差异的测定，精确定位与猪流感病毒增殖、复制、致病性和免疫逃避等相关的基因区段，揭示猪流感病毒致病的分子机制。

由猪流感病毒引起的猪流感是危害当前养猪业的重要疫病。猪流感病毒NA 基因在进化过程中选择不同的“茎部-Motif”对HA-NA 活性平衡、病毒复制和致病性等有何影响，目前还不得而知。NS1真核转录启动因子（eIF4GI）结合区内5 氨基酸自然缺失的生物学意义及eIF4GI 结合区进一步缺失截短对猪流感病毒分子进化、复制及致病性的影响值得深入研究。本项目利用反向遗传技术成功构建了流感病毒NA及NS1突变株，对突变株生物学特性、毒力、致病性进行了全面评价。课题进展顺利，超额完成课题任务书规定的任务。获得了9株不同NA“茎部-Motif”和5株NS1eIF4GI结合区突变的重配病毒，证实NA基因茎部出现的第49-68位共20个氨基酸缺失的特殊的“茎部-Motif” 可能是2000年后H5N1病毒毒力和致病性增强的一个重要因素；发现NS1 蛋白5个氨基酸的缺失可提高病毒对鸡和小鼠的毒力和致病性，NS1 eIF4GI结合区的缺失导致病毒毒力显著致弱，降低了病毒抑制宿主干扰素产生的能力。揭示了流感病毒致病的分子机制。发表标注本项目资助SCI论文7篇，获国家科技进步二等奖1项，培养硕士研究生3名。