中文摘要
肠毒素大肠杆菌(简称ETEC)是引起仔猪黄痢、白痢、猪水肿病等病主要病原体之一。F4粘附素(K88)是其中最常见的粘附素,仔猪小肠上皮细胞有无F4受体(ETEC F4R)是仔猪感染时是否发病的关键,检测仔猪有无F4R也是实施抗病育种的关键。国外虽然做了一些研究,但多数为F4抗原的分型,受体基因座的定位,受体的生化特性及其免疫特性等方面,非常缺乏从遗传机制入手开展抗病育种研究。.本课题是国家自然科学基金 "猪肠毒素大肠杆菌F4受体相关基因检测与克隆"(30371030)的延续。计划采用基因芯片技术,结合蛋白质谱差异显示技术,发现猪基因组中的ETEC F4R候选基因,继续深入进行GPI 1 基因作为F4adR候选基因研究,重点发现ETEC F4abR、F4acR的候选基因,进行候选基因的克隆测序,筛选出与F4abR、acR、adR相关的SNP,为进一步开展猪 ETECF4的抗病育种提供依据。
结题摘要
仔猪泻痢是养猪生产中常见疾病,肠毒素大肠杆菌(ETEC)是导致仔猪腹泻最重要的病原菌,它可引发多种传染病,F4(K88)是ETEC最常见的一种粘附素。ETEC能否结合到猪的小肠上皮细胞,决定于猪小肠粘膜有无受体。无受体的猪即使在受到细菌感染时也不发病。因此, F4受体对于仔猪腹泻的抗病育种具有重要意义,目前国内外对于F4受体开展了一些研究,但始终没有定论。本研究从猪基因组范围筛选与ETEC F4受体有关的拷贝数量变异(CNVs);并对部分F4受体候选基因进行了功能和结构研究,筛选相关的分子标记;并进一步检验得到的分子标记,为动物分子抗病育种开辟一种新途径。本项目得到了与F4受体相关的CNV66个,并初步得到了90个相关基因。采用差异显示技术筛选F4黏附型有关的差异片段,将其中42条EST登录到GenBank中。并进一步确定了5个候选基因。对候选基因进一步研究,检测到与受体相关的SNP,并且可望应用于抗病猪的选育中。本部分内容申请2个国家发明专利,其中一个已得到授权。本研究共发表标注受资助的论文7篇,申请专利2项,培养博士后1名,拟毕业博士2名,获得省自然科学奖3等奖1项。
