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猪星状病毒细胞受体的筛选和鉴定

猪星状病毒细胞受体的筛选和鉴定
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  • 批准号:31460671
  • 批准年度: 2014年
  • 学科分类:兽医病毒学(C180202) |
  • 项目负责人:黄伟坚
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:广西大学
  • 资助金额:50万元
  • 项目类别:地区科学基金项目
  • 研究期限:2015年01月01日 至 2018年12月31日
  • 中文关键词: 猪星状病毒;受体;筛选;鉴定
  • 英文关键词:porcine astrovirus;cellular receptor;screening;identification

项目摘要

中文摘要

我们前期研究工作表明,猪星状病毒在国内猪群有着较高的流行率,并将阳性材料在PK-15细胞中连续传代分离出两株具有较高生长滴度的猪星状病毒 (PAstV1-NNJG7和PAstV1-GX1),致病性实验表明病毒感染仔猪出现轻微腹泻,增重减少,说明猪星状病毒危害着猪养殖业。目前,国内外对星状病毒的流行病学和诊断技术的研究较多,尚未对猪星状病毒细胞受体的进行研究的报道。本课题中,拟通过梯度密度离心和多聚物双水相方法提取PK-15细胞质膜,提取膜蛋白。采用病毒铺覆蛋白印迹(VOPBA)、免疫共沉淀(CO-IP)和蛋白化学交联等方法筛选病毒候选受体。再用病毒受体重建、RNAi技术进一步鉴定候选受体。本研究为阐明猪星状病毒定植、分布、传播和致病的分子机制提供科学依据。

英文摘要

Our previous studies showed that high prevalence of porcine astrovirus in swine herds was detected by RT-PCR. Two strains of porcine astrovirus named PAstV1-NNJG7 was isolated and identified in PK-15 cells inoculated with suspension of astrovirus-positive tissue. Piglets challenged with porcine astrovirus (PAstV1-NNJG7 and PAstV1-GX1) showed diarrhea and loss of weigh, threatening development of swine industry. In this proposal, membrane proteins of PK-15 will be isolated and purified by density gradient centrifugation procedures and aqueons two-phase system. The candidate cellular receptor will be screened by VOPBA、CO-IP and emulsion-chemical cross linking method and further identified by RNAi and receptor reconstruction. Our studies will enhance our understanding the location and distribution and transmission and pathogenicity of porcine astrovirus.

评估说明

    国家自然科学基金项目“猪星状病毒细胞受体的筛选和鉴定”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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