在过去工作的基础上，应用Western blot、Southern blot、原位杂交和免疫荧光双标记等技术，观察切割海马伞海马中Brn-4基因和蛋白的表达变化；并通过体外细胞培养，检测切割海马伞海马提取液促进神经干细胞向神经元分化过程中，以及应用Brn-4抗体和RNA沉默阻断Brn-4的作用后，分化细胞中Brn-4和神经元特异性标志物β-tubulin Ⅲ的共表达情况；还通过动物实验，检测切割海

Brn-4在海马神经干细胞(NSCs)向神经元分化中是否发挥作用尚无报道。本研究发现切割(穹窿)海马伞的海马中，Brn-4 mRNA和蛋白的表达呈现由低到高再到低、切割后14天表达最高的时相特点。切割海马伞的海马提取液加至培养的海马NSCs中，14天后Brn-4/MAP-2双标神经元最多、发育最成熟，Brn-4免疫荧光最强；Brn-4抗体可影响海马NSCs向神经元分化；用siRNA沉默Brn-4基因，海马NSCs Brn-4的表达和向神经元的分化均受到明显影响；将重组pEGFP-C1-Brn-4质粒转染至海马NSCs中，过表达Brn-4的NSCs向神经元的分化率约为对照组的3倍，成熟度也好于对照组。切割大鼠海马伞，腹腔注射BrdU，切割侧海马齿状回中增殖的NSCs明显增多，切割后1-2天呈BrdU/nestin双标阳性，3天后nestin表达明显减少，Brn-4的表达逐渐增强，随之BrdU/Brn-4/β-tubulin Ⅲ三标神经元逐渐增多，表明Brn-4的表达与海马NSCs向神经元的分化同步。上述提示，转录因子Brn-4在海马神经再生的NSCs向神经元分化过程中发挥重要作用。