中文摘要
由于弧菌分布广泛,致病种类多样,危害严重,对海洋各种环境中弧菌群落的监测开始受到关注。病原性弧菌的致病株携带毒力基因,非致病株也可以通过毒力基因水平转移转变为致病株。霍乱、副溶血、创伤弧菌对人类健康危害最为严重,它们携带的重要毒力基因-ctxAB、VPI、tdh、trh、met、vhl发生水平转移带来的风险较之其它弧菌的毒力基因水平转移更大。因此,迫切需要掌控这6种弧菌毒力基因在环境弧菌株中分布的第一手资料。.本项目拟建立特异性分析弧菌群落结构的锚定rpoB基因的PCR-DGGE方法及检测致病弧菌重要毒力基因的PCR方法。通过这两种方法对华南沿海各典型海域的弧菌群落进行分子监测并调查致病弧菌重要毒力基因在环境分离弧菌菌株中的分布。本项目对弧菌生态学研究有重要理论意义,也将为弧菌分子流行病学研究积累有价值的基础资料,同时可对弧菌病的流行暴发起预警作用,避免由此引起的风险和损失。
结题摘要
采用分子的方法监测环境弧菌群落的变化以及调查重要致病弧菌的毒力基因在环境弧菌株中分布具有重要的意义。本项目建立了基于recA基因的PCR-DGGE方法重点对华南沿海三省共八个地区的弧菌群落进行分子监测,同时以从这些地区分离的弧菌株携带毒力基因的携带情况进行调查。结果表明:华南沿海的弧菌种类多样,优势种明显。样品所在区域的弧菌群落结构不因为空间毗邻而群落结构相似,也不因在同一个季节就结构相似,这说明不同地区的弧菌群落受地理环境和人类活动影响比较大。毒力基因或毒力相关基因met、vpiT在环境弧菌中出现的比例大于10%,暗示潜在的致病风险,其它的毒力基因(如:tdh、trh)出现机率非常低或不出现。总体而言,环境弧菌毒力基因携带的比例非常低,发生弧菌爆发流行的可能性较低。此外,本研究发现一些和基因水转移相关的元件广泛分布于溶藻弧菌中,这说明溶藻弧菌很可能与环境中的弧菌及其它细菌进行着频繁的基因交流,这同时也为毒力基因的传播提供了便利条件。本项研究中成果可以用于快速监测弧菌群落的变化,从而反映出某个地区海洋环境的变化情况,也可以用于分析某一地区毒力基因的出现频率,结合弧菌群落分析方法,
