我们前期工作表明:糖皮质激素（GC）抵抗这一临床现象可能是神经-内分泌-免疫内环境失衡的重要表征，其一方面可直接影响患者对外源性（药物性）GC的治疗反应及副作用的产生，影响治疗及预后；另一方面，可能导致机体对内源性（分泌性）GC的免疫调节无/低反应性，参与、诱导免疫损伤性肾炎的发生、发展。就此本课题组进行了长达十年的研究，在基因/蛋白层面发现了多种与GC抵抗相关的机制。然而，我们和国外的一些最新的研究都提示了并非所有GC抵抗都出现在基因/蛋白的问题上，尤其是对糖皮质激素受体（GR）不同亚型的研究，提示GC抵抗很大可能来源于表观遗传修饰上的差异。为进一步阐述激素反应性多样化的成因，本研究拟着重研究：GC抵抗的表观遗传学改变，即GR 启动子区的甲基化方式如何决定GC 的反应性以及和免疫损伤性肾炎的关系,为临床了解免疫损伤性疾病的起因提供新的思路，为诊断GC抵抗提供新的靶点，从而实现GC 的个化

为了研究激素治疗所引发的糖皮质激素抵抗现象的内在机制，我们通过长期(大于2周)，高浓度(10-6M)地塞米松刺激的方法，建立了一种激素抵抗细胞模型，并用流式细胞仪检测细胞对激素诱导凋亡的抵抗能力的方法进行验证。我们尝试过的细胞系包括U937、A549及Hela。细胞模型建立成功之后，我们用RT-PCR的方法测定了对照(激素敏感）及激素抵抗细胞的GR、GRα、GRβ、GRP、1D、1J、1E、1F、1C、1H的mRNA表达水平。于此同时，用MassArray的方法对两组细胞的DNA甲基化水平进行检测。U937细胞中建立失败，但在A549细胞系及Hela细胞系中取得成功。mRNA分析发现，与对照组相比，激素抵抗组细胞的GR、GRα、GRβ、GRP及外显子1J、1B、1C、1H的表达水平下降，其余第一外显子未检出。NR3C1基因的CpG岛平均甲基化水平在5%以下。除启动子1F外，抵抗细胞所有测得启动子序列的甲基化水平均高于对照组。由于CpG位点过于密集，无法设计出启动子1C及1H序列的扩增引物。但因其mRNA水平下降，我们高度怀疑二者同样呈高甲基化状态。