蛋白激酶Cδ（PKCδ）广泛参与诸如细胞增殖、凋亡、分化等细胞生命活动，在多种疾病如肿瘤的发展演变中发挥重要作用。最近，我们报道诱导分化剂全反式维甲酸和佛波酯通过磷酸化活化蛋白激酶Cδ（PKCδ），诱导磷脂酰爬行酶PLSCR1的表达和白血病细胞分化，而新型喜树碱类似物NSC606985通过剪切活化PKCδ诱导白血病细胞凋亡。这些研究提示不同的下游信号分子参与不同活性形式的PKCδ的生物学效应。由于PKCδ属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，本课题组试图在建立诱导表达剪切活化PKCδ的白血病细胞系的基础上，利用磷酸化蛋白质组学技术，探讨PKCδ的磷酸化蛋白底物，为深入研究PKCδ的信号传导通路及其在细胞分化和凋亡过程中的作用提供重要线索，推动新的学科生长点的形成。

蛋白激酶Cδ已经被证实与DNA损伤诱导的细胞凋亡/死亡密切相关，并且该蛋白的活化和细胞内定位对于细胞凋亡具有重要的调节作用。PKCδ作为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶通过磷酸激活下游底物，启动相应信号传导通路。然而，除了目前仅有少量发现的蛋白激酶Cδ底物（如DNA-PK、Lamin B、PLS1、PLS3）外，对于蛋白激酶Cδ如何同过它的下游底物传导凋亡信号还知之甚少。为了能更多的鉴定一批潜在的与蛋白激酶Cδ相关的下游底物磷酸化蛋白，本课题建立了一套高通量底物磷酸化蛋白识别系统。该系统包括有细胞水平的分级分离，磷酸化蛋白的富集，双相电泳分离，特异的磷酸化蛋白荧光染料识别以及质谱鉴定。同时，我们建立了两种可以引起蛋白激酶Cδ剪切活化的系统，分别是50nM NSC606985（喜树碱衍生物）处理的U937细胞系，及四环素撤除的诱导表达蛋白激酶Cδ活化片段的细胞系。利用上述两种不同的体系，我们分别比较了在不同时相下的核组分内磷酸化蛋白的差异表达，在喜树碱衍生物处理的U937细胞系里，我们发现了有16个差异表达磷酸化蛋白，而在诱导表达蛋白激酶Cδ活化片段的细胞系中，我们发现了有33个差异表达磷酸化蛋白