天蓝色链霉菌具有复杂的生长周期和形态分化，而且可以产生广泛的次生代谢产物，无疑需要多水平的调控系统及各种类型的信号传导机制。生物信息学分析表明，该菌除了含有大量双组分调控系统以外，还具有相当数量的真核样Ser/Thr蛋白激酶。目前，对于天蓝色链霉菌信号传导机制的研究主要集中于双组分调控系统。但关于Ser/Thr蛋白激酶的研究报道则很少。鉴于此，本项目拟应用PCR-targeting技术构建天蓝色链霉菌丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的缺失突变体库，结合基因芯片及酵母双杂交等技术和方法系统研究天蓝色链霉菌中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的生物学功能及其在次生代谢或形态分化发育过程中的分子调控机制，从而进一步拓展大家对链霉菌中信号传导机制的认识,同时也为有效提高链霉菌中重要次生代谢产物产量的代谢工程有理设计提供理论依据。

通过本项目研究，我们构建了天蓝色链霉菌M145 Ser/Thr蛋白激酶基因的部分缺失突变体库（共16个），通过表型筛选获得一株具有明显表型的缺失突变体，主要表现为生长速度显著变慢，这与生物学信息分析该蛋白可能参与能量代谢是完全一致。构建了M145的酵母双杂交文库，库容量符合酵母双杂交的实验需要。通过蛋白激酶基因在大肠杆菌中的表达纯化及体外磷酸化实验，我们证实了不同Ser/Thr蛋白激酶具有不同的金属离子依赖性。这些实验结果为Ser/Thr蛋白激酶的机制研究打下了很好的基础。