中文摘要
本项目以谷氨酸棒杆菌为出发菌株,利用2D凝胶电泳对絮凝剂高产突变株与絮凝剂缺陷突变株不同生长阶段的胞内酶进行对比研究,通过与相关数据库进行信息匹配,获取絮凝剂合成支路关键酶的同源性信息,进而将其基因序列在染色体基因组中定位并获得其基因与结构详细信息。在此基础上,采用PCR定点突变技术改造关键酶基因组成,构建絮凝剂高效表达系统。以优化工程菌株生产工艺、提高目标产物表达效率为目标,通过改进菌株培养与发酵条件,最终实现生物絮凝剂的高通量合成。
结题摘要
项目以谷氨酸棒杆菌和地衣芽孢杆菌为研究对象,分别采用2D凝胶电泳、转座诱变和构建基因组文库的方法对细菌絮凝基因进行了探索性研究;获得了两个高产菌株的最佳发酵工艺,并利用数学模型对谷氨酸棒杆菌的分批发酵过程进行了数学模拟,对地衣芽孢杆菌合成絮凝剂的应用研究揭示了该生物絮凝剂的工业化应用潜力。本项目开辟了细菌絮凝基因的研究领域,对絮凝基因的前期工作是重要的补充,取得的成果为进一步利用代谢工程的手段从分子水平上改造菌株提供重要依据,同时为指导生物絮凝剂的发酵过程优化控制提供了基础,对于推动生物絮凝剂的基础理论研究和实际应用都具有积极而重要的意义。
