本项目以自育的晒烟胞质源烟草雄性不育系和保持系为材料，以mtDNA为中心，基于若干已知的植物雄性不育相关基因序列设计引物，同时筛选RAPD引物，PCR扩增不育相关基因(片段)，并制备分子探针，进行DNA分子杂交；根据PCR产物的序列设计特异引物，采用RACE方法分离不育相关基因全序列。企望克隆烟草雄性不育相关基因，分析烟草雄性不育相关基因与已知植物雄性不育基因的异同点，为揭示烟草雄性不育的分子机理、深化烟草雄性不育杂种优势利用的理论和应用研究奠定基础。

植物雄性不育性在杂种优势利用中有重要价值，对植物雄性不育的分子机理研究具有重要意义。本研究以新质源烟草胞质雄性不育系和保持系为材料，基于若干线粒体基因序列设计引物，克隆和测定了烟草雄性不育候选基因orf25、atp6、atp9、coxⅡ的DNA序列，发现这几个基因的DNA序列在不育系和保持系间都有明显的差异，不育系的这些基因有多处碱基突变。利用PCR- RFLP方法搜寻不育相关基因中的SNP位点并研究其与不育性之间的关系，以7个烟草CMS系及其相应的保持系为材料，对atp6基因中第59位A→C的突变进行了大量个体的检测及分析，结果表明，atp6基因第59位的SNP位点与烟草CMS特性存在显著的相关性；对coxⅡ基因中第770位C→G的突变进行了大量个体的检测及分析，结果也表明，coxⅡ基因第770位的SNP位点与烟草CMS特性存在极显著的相关性。这为揭示烟草雄性不育的分子机理、深化烟草雄性不育杂种优势利用打下了基础。