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间隙连接蛋白在绵羊胚胎发育过程中的功能研究

间隙连接蛋白在绵羊胚胎发育过程中的功能研究
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  • 批准号:30660123
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:反刍动物遗传育种(C170303) |
  • 项目负责人:马玉珍
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:内蒙古大学
  • 资助金额:21万元
  • 项目类别:地区科学基金项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2009年12月31日
  • 中文关键词: 间隙连接蛋白;绵羊;胚胎;发育
  • 英文关键词:;;;sheep;embryonic development

项目摘要

中文摘要

前期研究发现在间隙连接蛋白家族中CX26、CX32、CX43、CX45基因在绵羊早期胚胎发育过程中表达,且在囊胚阶段,间隙连接蛋白的表达在内细胞团和滋养层细胞间有显著差别。在此研究的基础上,本研究主要通过转基因体细胞克隆和RNA干涉(RNAi)技术,研究以上4种间隙连接蛋白的过表达或失表达与间隙连接通道形成、通道性质、胚胎致密化、细胞分化的关系,以及对信号物质传递、胚胎代谢情况和相关基因和蛋白表达丰度的影响,从而了解间隙连接蛋白在绵羊胚胎发育过程中的作用,深入了解胚胎早期的发育机理,提高体外生产胚胎的质量,为胚胎体外培养系统的改善提供基础理论依据。

结题摘要

为了探讨间隙连接蛋白过表达对绵羊早期胚胎发育的影响。PCR扩增绵羊Cx26、Cx32、Cx43、Cx45基因cDNA序列,构建以上基因过表达载体,脂质体介导载体DNA转染绵羊胎儿成纤维细胞,G418筛选转基因细胞,将其显微注射到去核卵母细胞中,通过融合、激活和发育培养,得到囊胚,过表达间隙连接蛋白各组与对照组比较,囊胚率没有显著性差异,但是Cx43和Cx45组囊胚率、囊胚细胞数高于Cx26和Cx32组,且有显著性差异。同时探讨了间隙连接蛋白失表达与绵羊早期胚胎发育的关系,体外合成干涉Cx26、Cx32、Cx43和Cx45表达的dsRNA小片段,显微注射于绵羊体外受精卵胞浆中,胚胎发育培养,间隙连接蛋白失表达各组与对照组比较,2细胞率、8细胞率没有显著性差异,Cx43和Cx45组囊胚率、囊胚孵化率和细胞数低于对照组。Cx26和Cx32组与对照组比较囊胚率、细胞数没有显著性差异。以上研究说明Cx43和Cx45基因表达可以促进胚胎发育和提高胚胎质量。体外着床实验结果表明Cx26和Cx43过表达组胚胎黏附率高于其他各组,说明Cx26和Cx43表达有助于胚胎着床,受孕。

评估说明

    国家自然科学基金项目“间隙连接蛋白在绵羊胚胎发育过程中的功能研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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