中文摘要
以我国特色中草药资源-藤茶为研究对象,研究资源中富含的主体活性成分二氢杨梅素的生物合成直接前体以及影响其合成、积累的关键酶,对关键酶进行初步性质和应用研究,同时运用合成前体对二氢杨梅素的合成和转化进行初步调控,为全面研究藤茶中二氢杨梅素的生物合成途径和运用藤茶资源生产其它特异性化合物打下基础。
结题摘要
本研究对野生藤茶进行了人工栽培实验,获得了成功。对藤茶进行了组织培养研究,诱导出了愈伤组织,制备了悬浮细胞。在悬浮细胞体系中通过添加外源前体物质,进行了前体研究,结果证实藤茶中二氢杨梅素合成的主要前体包括苯丙氨酸、酪氨酸、肉桂酸和乙酸钠等多种可参与形成查尔酮的物质。项目同时利用高速逆流色谱系统(AKTA prime +GS10A)对粗酶进行了分离、纯化,并与前体物质共同进行了二氢杨梅素的合成调控,结果证实藤茶中二氢杨梅素合成的关键酶是一个复杂的酶体系,存在于分离出来的D部位。项目对藤茶中苯丙氨酸解氨酶、总黄酮、二氢杨梅素、游离苯丙氨酸的含量进行了测定并研究了其相关性,同时对其中的苯丙氨酸解氨酶进行了性质、分离纯化等研究,结果证实,藤茶中的苯丙氨酸解氨酶是藤茶中二氢杨梅素合成的一种关键酶,但其具有一定的特殊性。项目同时利用高速逆流色谱系统(AKTA prime +GS10A)对主体化合物二氢杨梅素和杨梅素进行了制备分离并获得了成功。
