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TRAF4家族新成员:人睾丸HSD-11基因参与细胞凋亡的分

TRAF4家族新成员:人睾丸HSD-11基因参与细胞凋亡的分
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  • 批准号:30600303
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:转录与调控(C060607) |
  • 项目负责人:胡炜
  • 负责人职称:助理研究员
  • 依托单位:中国医学科学院
  • 资助金额:8万元
  • 项目类别:国际(地区)合作与交流项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2007年12月31日
  • 中文关键词: TRAF4;家族;新成员;HSD-11;凋亡
  • 英文关键词:HSD-11;RNA interference;cell a

项目摘要

中文摘要

HSD-11基因是本组从人睾丸cDNA文库中扩增得到的一个新基因,与TRAF4相关因子1完全同源,推测其在细胞凋亡中发挥重要作用。为深入探讨其参与细胞凋亡的机制,本研究将构建含有全长HSD-11cDNA的真核表达载体和包含由不同启动子(鼠源、人源U6启动子或人源H1启动子)启动的有效HSD-11基因沉寂序列的真核表达载体,分别转染Hela、GC-1(精原细胞)和GC-2(精母细胞)细胞,G418筛选、流式分选获得过表达或沉寂HSD-11基因的稳定克隆。观察HSD-11基因与细胞凋亡的关系,并检测其对凋亡相关因子表达的影响,以探讨HSD-11基因在细胞凋亡通路中的作用。同时利用基于免疫共沉淀的质谱技术,寻找与HSD-11相互作用的蛋白质。这项研究不仅有助于阐明HSD-11参与细胞凋亡的分子机制,也为阐述其在精子发生中的功能机制提供了重要的理论依据。

结题摘要

HSD-11基因是本组从人睾丸cDNA文库中克隆得到的一个新基因,与TRAF4相关因子1高度同源。因此,推测其可能在细胞凋亡中发挥重要作用。本研究将构建好的质粒pcDNA6/HSD11和干扰HSD11表达的RNAi载体pSilenceE1+F1分别转染Hela细胞,结果发现过量表达HSD11基因可增加Hela细胞对包括TNFα和紫外线在内的多种凋亡刺激因子的敏感性。而采用RNA干扰技术抑制HSD11基因表达则导致Hela细胞可以拮抗多种凋亡刺激因子诱导的细胞凋亡。进一步研究了HSD11基因对Bcl-2、Bcl-xL、Bax和Bak等分子在凋亡因子刺激前后的表达水平的变化,结果发现过量表达HSD11基因降低了Hela细胞中Bcl-xL的表达水平,而抑制HSD11基因的表达有助于Hela细胞在受到凋亡刺激时维持Bcl-xL的表达水平。因此,HSD11基因可能是通过调节Bcl-xL的表达水平来调节细胞对凋亡刺激因子的敏感性。但加入CHX则可以逆转HSD11对Bcl-xl的改变。另外,我们采用免疫共沉淀结合质谱技术鉴定出一个可能与HSD11基因相互作用的基因MYH9,二者相互作用还需进一步证明。

评估说明

    国家自然科学基金项目“TRAF4家族新成员:人睾丸HSD-11基因参与细胞凋亡的分”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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