中文摘要
以人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段(β1-AR-ECII)建立大鼠长期主动免疫模型,观察此模型是否可以诱导大鼠在体心肌细胞凋亡;用心衰大鼠模型诱导的抗β1-AR-ECII抗体阳性血清建立大鼠被动免疫模型,观察并比较此两种模型在诱导大鼠在体心肌细胞凋亡中的异同。采用琼脂糖凝胶电泳技术、免疫组化技术、微量酶活性检测技术、免疫印迹技术以及RNAi技术观察抗β1-AR-ECII抗体对培养的成年大鼠心肌细胞致凋亡作用的机制和主要信号转导途径。通过腹腔植入渗透泵给予caspases抑制剂,观察抗β1-AR-ECII抗体诱导的心肌细胞凋亡对大鼠在体心功能的影响。从细胞水平和整体水平阐明抗β1-AR-ECII抗体致心肌细胞凋亡的机制和可能的意义,从而加深对抗β1-AR抗体阳性的心脏疾病发生过程中自身免疫机制的理解,并为临床治疗相关疾病提供新思路。
结题摘要
以人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段(β1-AR-ECII)建立大鼠长期主动免疫模型,观察抗β1-AR-ECII抗体是否可以诱导大鼠在体心肌细胞凋亡;同时给予细胞凋亡的抑制剂,观察凋亡抑制后心肌重构及心功能是否会好转。同时为排除模型建立过程中抗原可能的心肌毒性作用,采用直接给入正常大鼠抗β1-AR-ECII抗体建立被动免疫模型的方法,观察抗β1-AR-ECII抗体长期存在对心肌重构、心功能及心肌细胞凋亡的影响,进而从不同角度论证该抗体是否可通过诱发心肌细胞凋亡来导致心肌结构重构的发生。在主动免疫过程中,对大鼠的心电活动进行监测,观察抗β1-AR-ECII抗体长期存在对大鼠心电图的影响,以求发现抗β1-AR-ECII抗体对大鼠心电重构的影响。同时,在主动及被动免疫模型建立过程中,动态监测肝肾结构和功能的变化情况,观察抗β1-AR-ECII抗体长期存在对大鼠肝肾的影响。从整体水平阐明抗β1-AR-ECII抗体致心肌重构及肝肾损伤的机制和可能的意义,从而加深对抗β1-AR抗体在心脏、肝脏、肾脏疾病发生过程中自身免疫机制的理解,并为临床治疗相关疾病提供新思路。
