中晚期肿瘤由于多发生转移而缺乏有效的治疗手段。肝素酶是近年来发现的与肿瘤浸润和转移密切相关的基因。我们过去的研究表明，肝素酶全长cDNA腺病毒或多肽表位负载的树突状细胞体内外可以诱导肝素酶特异性CTL反应，对肝素酶阳性且MHC相匹配的肿瘤细胞具有明显的杀伤效应，而对自体淋巴细胞不具有杀伤作用，提示肝素酶可以作为一种广谱的肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤的免疫治疗。与全长cDNA腺病毒疫苗相比，多肽疫苗具有不需要病毒载体、体外可以合成等优点，但多肽疫苗免疫原性弱、穿透力不强。为克服上述缺点，本项目首先预测并鉴定更多的肝素酶多肽表位,然后在筛选的肝素酶多肽表位前加Tat穿膜肽，体内外比较融合肽疫苗的抗肿瘤效应，最后对有效的肝素酶融合肽进行不同的组合，研究不同组合的融合肽疫苗体内外抗肿瘤效应，期望找到一个或多个具有较强杀伤效应的肝素酶融合肽混合疫苗，为肝素酶混合多肽疫苗的临床应用提供理论依据。

中晚期肿瘤由于发生转移而缺乏有效的治疗手段。肝素酶是近年来发现的与肿瘤浸润和转移密切相关的基因。我们过去的研究表明肝素酶可以作为一种广谱的肿瘤转移相关抗原用于中晚期肿瘤的免疫治疗。在本研究中我们采用生物信息学技术和反向免疫学技术鉴定了8条人肝素酶多肽表位，体外和体内研究证实肝素酶混合表位Hpa525+277+405+16和Hpa8+310+315+363诱导的CTL对多种不同组织器官来源的恶性肿瘤的杀伤效应显著高于单个表位诱导的CTL，略低于全长cDNA诱导的CTL；肝素酶表位混合疫苗和单个表位疫苗诱导的效应细胞对多种不同组织器官来源的肿瘤细胞的杀伤是肝素酶特异性的，并且受HLA-A2.1的限制。体内外毒副作用研究结果证实肝素酶表位混合疫苗和单肽疫苗诱导的效应细胞对自体淋巴细胞和DC均不具有明显的杀伤效应；体内、外研究证实肝素酶表位混合疫苗和单肽疫苗诱导的效应细胞均能分泌大量的IFN-γ，证实肝素酶表位能活化CD8+T细胞，并产生非特异性的抗肿瘤免疫效应。为肝素酶表位混合疫苗的临床应用提供了实验依据和理论基础。