中文摘要
Connexin(Cx)是构建细胞间隙连接的主要蛋白质,其通过建立细胞间隙连接通讯(GJIC)参与细胞周期调控,在细胞生长、分化和抑制恶变过程中发挥作用。我们前期研究表明:肺癌细胞转染Cx43基因后,有些细胞系形成了细胞间隙连接通讯,而有些细胞系未形成,但两种情况都抑制了肺癌细胞生长,故Cx43蛋白尚存在不依赖细胞间隙连接通讯抑制细胞增殖的作用机制。为探讨Cx43蛋白的调控机制,本项目拟采用免疫共沉淀结合串联质谱技术研究Cx43蛋白在细胞内参与细胞周期调控的作用靶点;拟采用基因转染及基因沉默技术,转染低表达或沉默高表达Cx43肺癌细胞的Cx43基因表达,并应用Real Time PCR、Western blot等技术检测基因转染及基因沉默前后Akt/p70S6K通路蛋白Akt、mTOR、p70S6K等基因及蛋白的表达,以探讨Cx43蛋白的抑癌机制是否与Akt/p70S6K信号传导通路有关。
