中文摘要
蛋白激酶B(PKB)是信号转导通路的重要调节因子,主要通过PI3K/PKB途径参与细胞生命活动的调节。我们的实验已经证明了PKB 的活化对于小鼠受精卵的发育是必需的,并且初步探讨了PKB/Cdc25B途径对受精卵发育的影响。本研究拟在前期工作的基础上,拟通过基因重组、体外磷酸化、质谱分析等方法,首先在体外确定PKB可以直接磷酸化Cdc25B,并找到准确的磷酸化位点;其次在受精卵中验证PKB磷酸化Cdc25B,进而改变MPF活性,促进受精卵的分裂;进一步应用共聚焦显微成像技术分析磷酸化以后的Cdc25B的亚细胞定位,探讨PKB/Cdc25B途径调节受精卵分裂的分子机制。本研究渴望为哺乳动物受精卵早期发育的机理研究提供直接的实验数据和有价值的理论信息。
结题摘要
蛋白激酶B(PKB)是信号转导通路的重要调节因子,主要通过PI3K/PKB途径参与细胞生命活动的调节,而PKB的活化对小鼠受精卵早期发育也是必需的。本研究在前期工作的基础上,首先在体外确定了PKB可以直接磷酸化Cdc25B,并找到准确的磷酸化位点,同时在受精卵中验证了该特异性位点磷酸化对MPF活性及受精卵卵裂的影响,明确了PKB/Cdc25B途径调节受精卵分裂的分子机制。与此同时,我们还探讨了PKB的其他可能作用底物,如p21,Myt1,以及PKB的上游蛋白PIPP在受精卵发育中的作用,从而完善了PI3K/PKB途径对受精卵发育影响的信号调节网络。本研究为哺乳动物受精卵早期发育的机理研究提供了直接的实验数据和有价值的理论信息。
