中文摘要
放疗是治疗头颈部肿瘤的主要方法之一,电离辐射在杀肿瘤细胞的同时,对正常的口腔粘膜组织也造成极大伤害,且目前尚无有效治疗措施。本课题在我们原有的研究基础上,采用既能促进口腔粘膜上皮修复,又能增强口腔内环境免疫的策略,选择特异性促进上皮细胞增殖的血管内皮细胞生长因子(VEGF121)和能抗细菌、抗真菌并能中和毒素的防御素-3作为实现这一思路的活性生物分子。在VEGF121和防御素-3两端设计loxP位点序列(该序列可被外源性Cre酶删除而适时关闭转染基因),将其克隆入多基因表达载体,并以壳聚糖纳米粒包裹,分别制成口含液,转染口腔粘膜上皮细胞以及转染体外培养的骨髓间充质干细胞,移植入口腔损伤粘膜,使损伤局部同时持续表达分泌VEGF121和防御素-3,促进创面愈合,当口腔粘膜损伤修复后,应用Cre酶删除转染基因,实现外源基因体内转染的可调控性,为防治口腔粘膜损伤提供新的途径。
结题摘要
放疗是治疗头颈部肿瘤的主要方法之一,电离辐射在杀肿瘤细胞的同时,对正常的口腔粘膜组织也造成极大的伤害,且目前尚无有效的治疗措施。本课题采用既能促进口腔粘膜上皮修复,又能增强口腔内环境免疫的策略,选择特异性促进上皮细胞增殖的血管内皮生长因子(VEGF)和能抗细菌、抗真菌并能中和毒素的人类β防御素3(HβD3)作为实现这一思路的活性生物分子。成功将其克隆到多基因表达载体中,并将其转染口腔粘膜上皮细胞以及转染体外培养的骨髓间充质干细胞(MSCs),之后,并移植入口腔损伤粘膜,使损伤局部同时表达分泌VEGF和HβD3,同时发挥这两种基因的作用,再加上骨髓间充质干细胞具有的向其他细胞分化的巨大潜能,共同促进创面愈合。动物实验充分证实:VEGF和HβD3双基因疗法能够加快口腔粘膜组织难愈性创伤的愈合;同时运用MSCs作为种子细胞对创伤愈合亦大有好处。同时多基因表达载体pVIVO1-mcs是瞬时转染的,治疗后不会对机体产生长久的作用,从而避免了其它并发症的产生。
