低氧诱导因子(HIF)是具有调节细胞增殖、肿瘤血管生成、代谢等重要功能的转录因子。HIF亚单位HIF-1a? 的过表达与前列腺癌的增殖，浸润，迁徙和抗凋亡作用有关。BCL-xL是BCL2家族抗凋亡分子，也被证实为低氧导致细胞凋亡抑制的关键分子。下调HIF-1a?和BCL-xL的表达均可促进前列腺癌细胞凋亡，增加对药物的敏感性，提示这两个分子间可能存在直接联系。本小组前期实验通过siRNA下调前列腺癌PC-3细胞中HIF-1a?的表达，发现随着HIF-1a?下调，BCL-xL也出现明显下调。用PI3K抑制剂LY294002处理PC-3细胞，HIF-1a?? 和 BCL-xL的表达都呈现剂量依赖性的减少。因此申请者首次提出BCL-xL可能受到HIF-1a??的直接调控。本课题旨在生物信息学分析的基础上运用检测DNA-蛋白质结合的有效手段证明HIF-1a ?对BCL-xL启动子的直接调控作用。

低氧诱导因子(HIF)是具有调节代谢、细胞增殖、肿瘤血管生成等多种生理和病理机能的转录因子。HIF亚单位HIF-1a的过表达与前列腺癌的增殖，浸润，迁徙和抗凋亡作用有关。BCL-xL是BCL2家族抗凋亡分子，也被证实为低氧导致细胞凋亡抑制的关键分子。下调HIF-1a和BCL-xL的表达均可促进前列腺癌细胞凋亡，增加对药物的敏感性，提示这两个分子间可能存在直接联系。本课题通过siRNA下调前列腺癌PC-3细胞中HIF-1a的表达，发现随着HIF-1a下调，BCL-xL也出现明显下调，同时伴有细胞增殖减慢，凋亡增加。用PI3K抑制剂LY294002处理PC-3细胞，HIF-1a 和 BCL-xL的表达都呈现剂量依赖性的减少。在生物信息学分析的基础上通过双荧光素酶活性分析实验、染色质免疫沉淀实验（ChIP）、凝胶电泳迁移（EMSA）和超级阻滞（supershift）实验首次证实：HIF-1a?通过结合BCL-xL启动子序列中的-859～-855位点的低氧反应元件（HRE）直接转录调控BCL-xL基因的表达。HIF-1a依赖性的BCL-xL的过表达可能是HIF-1a?抑制凋亡的重要机制。