牙鲆HRI是鉴定的第一个鱼类HRI基因。本项目拟构建野生型、突变型和siRNA表达载体，转染细胞并进行筛选，分别获得HRI基因过量表达和功能缺失的细胞。检测这些细胞的抗病毒感染能力，明确HRI基因的抗病毒功能。采用免疫共沉淀方法研究HRI和底物eIF2α之间的相互作用，并进一步分析HRI发挥作用时底物磷酸化的变化，阐明HRI的抗病毒作用途径和机制。通过基因组步移的方法克隆HRI基因的启动子等关键顺式调控元件，进行缺失或突变，采用调控元件－报告基因系统分析其功能。并通过凝胶迁移率实验研究调控元件与反式因子之间的作用，阐明HRI基因的表达调控机理。本项目首次对HRI基因的抗病毒功能和机理进行探讨，对揭示HRI基因在非类红细胞中的功能具有重要意义，也为研究eIF2α激酶家族成员在抗病毒免疫中的功能联系奠定基础。

牙鲆HRI是鉴定的第一个鱼类HRI基因。本项目首先通过过量表达和功能缺失研究了HRI的抗病毒功能。在细胞中过量表达野生型HRI能导致eIF2α磷酸化水平增强，从而抑制病毒增殖；而当过量表达丧失激酶活性的HRI突变体则无此效应。RNA干扰实验进一步证实HRI表达受抑制时，eIF2α的磷酸化水平没有明显的变化，且病毒的复制增加。免疫共沉淀也证实HRI能结合eIF2α，表明HRI能通过磷酸化底物eIF2α而抑制病毒蛋白翻译。采用基因组步移的方法获得了HRI基因的启动子序列，该序列具有典型的TATA和CAAT元件。HRI主要定位于细胞质中，激酶区的失活突变对HRI的定位没有影响。与之前鉴定和另一个eIF2α激酶PKR相似，在病毒诱导细胞和组织中，HRI的表达上调。本项目研究结果证实了鱼类HRI基因在抗病毒免疫反应中发挥抑制蛋白翻译的功能。