中文摘要
广州管圆线虫病(angiostrongyliasis cantonensis)是由广州管圆线虫幼虫侵入中枢神经系统引起的以急性剧烈头痛为主要表现的嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎或脑膜脑炎。目前认为广州管圆线虫入侵中枢神经系统是其生长发育的关键阶段,然而,对于广州管圆线虫如何突破肠壁和血脑屏障进入到中枢神经系统中尚不清楚。本课题拟:①观察体内动物实验检测感染广州管圆线虫小鼠脑组织与肠壁组织中的细胞凋亡情况;②观察广州管圆线虫幼虫提取液是否可以引起体外建立的血脑屏障模型及肠上皮细胞发生细胞凋亡以及对血脑屏障通透性的影响。其研究结果将为广州管圆线虫病的发病机理提供较全面的实验依据,为广州管圆线虫病的防治提供帮助,同时有望填补国内外有关线虫入侵血脑屏障与细胞凋亡相关性的研究空白。
结题摘要
广州管圆线虫感染后,宿主可出现血脑屏障功能障碍、通透性增加,但相关机理并不明确。为此,本研究通过两部分实验进行研究:(1)建立广州管圆线虫幼虫实验感染小鼠模型,对其脑组织中细胞凋亡情况进行检测。结果表明:与对照组相比,实验组小鼠脑组织出现了明显的细胞凋亡现象。TUNEL检测发现,凋亡主要位于小鼠的大脑、小脑及脑干,其细胞凋亡率分别为20%、50% 与70%。Western-blot结果进一步证实随着幼虫感染小鼠时间的增加,leaved Caspase3表达量也增加。(2)构建小鼠血脑屏障体外培养模型,该模型由小鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)与脑星形胶质细胞(BACs)共培养所获得。通过4小时渗滤实验与HRP通透性实验,我们发现与对照组相比,广州管圆线虫幼虫提取液作用的实验组中,血脑屏障模型的通透性显著增加。TUNEL法与annexin-V-FITC/PI法均证实广州管圆线虫幼虫提取液可诱导BMECs与BACs发生细胞凋亡。因此,我们认为在广州管圆线虫感染所致宿主血脑屏障功能障碍过程中,由幼虫诱导的细胞凋亡发挥着重要作用。此研究结果将对治疗、预防由广州管圆线虫病提供新的思路。
