中文摘要
猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征的主要病原。本课题以猪的肺泡巨噬细胞为研究模型,利用双向凝胶电泳技术(2-DE)和质谱分析技术,筛选分析猪圆环病毒2型感染的与未感染的猪肺泡巨噬细胞差异表达蛋白质,并借助串联质谱技术鉴定差异蛋白点,运用生物信息学分析对差异蛋白的功能进行预测与分类。选取差异蛋白中可能与病毒复制相关的关键蛋白进行相关基因的克隆及重组表达,并通过共定位分析和免疫共沉淀等方法验证目的蛋白与猪圆环病毒2型Rep蛋白的相互作用,从蛋白组学角度系统分析猪PCV2 感染对宿主细胞代谢的影响以及PCV2 Rep蛋白与宿主细胞蛋白之间的互作机制,为深入研究PCV2的致病机理、研制疫苗、药物设计和制定针对圆环病毒感染的有效防控措施提供理论依据。
结题摘要
猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪断奶后多系统衰竭综合征的主要病原。本课题以猪肾细胞PK-15为研究模型,利用双向凝胶电泳技术(2-DE)和质谱分析技术,筛选分析猪圆环病毒2型感染的与未感染的PK-15细胞差异表达蛋白质,并借助串联质谱技术鉴定差异蛋白点,运用生物信息学分析对差异蛋白的功能进行预测与分类。选取差异蛋白中可能与病毒复制相关的关键蛋白进行相关基因的克隆及重组表达,并通过共定位分析和免疫共沉淀等方法验证目的蛋白与猪圆环病毒2型Rep蛋白的相互作用,从蛋白组学角度系统分析猪PCV2 感染对宿主细胞代谢的影响以及PCV2 Rep蛋白与宿主细胞蛋白之间的互作机制,为深入研究PCV2的致病机理、研制疫苗、药物设计和制定针对圆环病毒感染的有效防控措施提供理论依据。
