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蜜蜂白垩病的病原鉴定与分子诊断技术研究

蜜蜂白垩病的病原鉴定与分子诊断技术研究
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  • 批准号:30800806
  • 批准年度: 2008年
  • 学科分类:蜜蜂病理、繁殖与饲养(C171002) |
  • 项目负责人:陈大福
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:福建农林大学
  • 资助金额:20万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2009年01月01日 至 2011年12月31日
  • 中文关键词: 蜜蜂;白垩病;病原;鉴定;诊断
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

蜜蜂白垩病是一种由球囊菌属(Ascosphaera)的真菌寄生而引起蜜蜂幼虫死亡的传染性疾病,对蜂群的群势发展影响极大,在近几年又呈现出大面积爆发的趋势。但到目前对于该病的病原鉴定尚不明确,尤其是对我国的病株从未进行种的鉴定,且对于该病的诊断多依赖于典型症状,方法极不可靠。本研究利用球囊菌属的各病原rDNA的ITS1-5.8S-ITS2序列资料,分别设计出高特异性引物,用PCR技术扩增出可用于鉴定病原物种的分子标记,并验证该分子标记的特异性、灵敏性和临床实用性,从而构建一套快速、准确诊断该病的分子技术。

结题摘要

蜜蜂白垩病是由真菌Ascosphaera引起蜜蜂幼虫死亡的疾病,为我国最严重的蜜蜂疾病,近几年呈爆发趋势。目前该病诊断方法主要依赖于典型症状和病原形态学特征,费时费力且不准确,同时难以在发病初期做出准确诊断。本研究在克隆病原分子标记的基础上构建分子诊断蜜蜂白垩病技术,研究进展如下:(1)分子标记克隆:成功克隆A. apis的一个442 bp特异片段,作为蜜蜂白垩病的诊断分子标记。(2)特异性验证:检测7种蜂群常见生物,仅A. apis能扩增出目标条带。说明该诊断分子标记不会受到其他杂菌和蜜蜂DNA干扰,对A. apis具有较高特异性。(3)灵敏性测定:通过浓度梯度稀释测出该诊断分子标记具相当高的灵敏性。(4)适用性检验:对取自不同蜂群且患病程度不同的幼虫不经病原菌的分离纯化,准确检测出A. apis,具有方便、快捷、准确的特点。并可检测出无症状幼虫体内A. apis,说明技术完全不依赖于症状。(5)重复性检验:对同一批次的样品均进行3次检测,结果一致,表明具有良好的重复性。(6)利用该技术鉴定出疑似白垩病的中华蜜蜂虫尸的病原为A. apis。这是首例发现中华蜜蜂罹患白垩病的报道。

评估说明

    国家自然科学基金项目“蜜蜂白垩病的病原鉴定与分子诊断技术研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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