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Graves'病相关新基因的生物学功能研究

Graves'病相关新基因的生物学功能研究
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  • 批准号:30670993
  • 批准年度: 2006年
  • 学科分类:甲状腺/甲状旁腺疾病及功能异常(H0709) |
  • 项目负责人:文格波
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:南华大学
  • 资助金额:29万元
  • 项目类别:面上项目
  • 研究期限:2007年01月01日 至 2009年12月31日
  • 中文关键词: Graves;生物学
  • 英文关键词:graves disease ;novel gene;biological function

项目摘要

中文摘要

在获得Graves'病相关基因全长cDNA(accession number:AY786414,暂命名为PRMT2L2)基础上,拟进一步应用RT-PCR及Northern-blot观察其在组织器官以及细胞的表达状况;构建绿色荧光蛋白与该基因的融合蛋白表达载体,观察该蛋白亚细胞定位;构建该基因的原核融合蛋白表达载体,制备其单克隆抗体;建立稳定表达该基因的甲亢细胞系;运用Western-blot等检测其是否参与ERα表达的调控;应用RNAi技术研究RNAi前后细胞生物学性状的改变;用ELISA检测GD患者血清中抗-PRMT2L2蛋白存在与否,以便对该蛋白自身抗体与TSAb进行对比分析,并检测PRMT2L2蛋白在GD患者或GD动物模型的B细胞、T细胞高表达对靶抗原应答效果,分析其对自身免疫反应的影响.上述工作有望阐明该基因的生物学功能,为揭示Graves'病发生的分子机理和防治提供新的理论依据。

结题摘要

研究背景:通过筛选正常甲状腺与Graves’病甲状腺组织间差异表达的基因,有助于阐明Graves’病发病的分子机理,进而为研发出特异性的基因诊断与治疗药物提供新的途径。目的:鉴定PRMT2新的差异剪接体的生物学功能。方法:应用荧光定量PCR、Western-blot及Northern-blot检测PRMT2及其新的差异剪接体在各种组织器官以及细胞株的表达状况;构建其真核表达载体与干扰载体,转染后,观察其对ERα阴性和ERα阳性细胞生物学功能的影响;建立双报告基因检测系统检测其对荧光素酶报告基因活性的影响;构建其原核表达载体检测与ERα的体内外相互作用。结果:PRMT2及其新的差异剪接体在各种组织器官均有表达,且在雌激素相关的甲状腺、乳腺等呈高表达;PRMT2及其新的差异剪接体能促进肿瘤细胞的凋亡;不论雌激素存在与否,PRMT2及其新的差异剪接体均能与ERα在体内外相互作用。但只有在雌激素存在时,才能提高含雌激素一致序列(ERE-luc)荧光素酶基因的转录活性;结论:PRMT2及其新的差异剪接体在雌激素信号传导途径上发挥着重要作用,可能为内分泌相关疾病的诊断与治疗提供新的途径。

评估说明

    国家自然科学基金项目“Graves'病相关新基因的生物学功能研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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