中文摘要
运用蛋白质组学相关技术结合免疫学技术,研究猪带绦虫、牛带绦虫、亚洲牛带绦虫的六钩蚴引起中间宿主最初免疫反应的特异性抗原及虫体的免疫逃避相关蛋白质;同时通过提取三种带绦虫基因组DNA,根据与寄生虫入侵相关的三种目标蛋白质即丝氨酸蛋白酶(SP)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)和金属蛋白酶(MP)的基因保守序列,设计引物扩增相应特异片段,利用免疫组化方法检测三种带绦虫不同发育阶段SP,Serpin和MP的表达。另外,从分子病理学角度研究三种带绦虫感染家猪后囊尾蚴和宿主的细胞凋亡。以阐明三种带绦虫幼虫入侵同种中间宿主后的免疫逃避机制及致病差异的原因,对预防猪囊虫病,保护生猪饲养业有实际价值,并将对了解猪带绦虫囊尾蚴可寄生于人体而两种牛带绦虫囊尾蚴不寄生于人体的原因提供重要参考资料,为制定人囊虫病的防治策略提供一定依据。
结题摘要
本项目运用蛋白质组学、免疫学及组织病理学等相关技术研究了猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫感染中间宿主家猪后幼虫(囊尾蚴)在猪体内的分布和发育、猪体组织病理学、免疫学和分子病理学变化及差异:包括肝组织细胞凋亡、组织及血清中IL-2,IL-6,IL-8,TNF-α和sIL-2R等细胞因子变化情况,病变组织2D电泳蛋白表达谱的差异等;观察了囊尾蚴免疫逃避相关蛋白乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽S转移酶-л(GST-л)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况;并对三种带绦虫早期囊尾蚴进行了2D电泳,得到了三种带绦虫幼虫的总蛋白表达谱,在此基础上利用感染血清作免疫电泳筛选出数个蛋白点,经质谱鉴定和生物信息学分析,得到猪带绦虫的4个抗原蛋白,亚洲带绦虫的2个抗原蛋白;为下一步研究工作奠定了基础。此外,研究发现猪带绦虫、亚洲带绦虫入侵早期即对宿主肠粘膜具有损害作用,囊尾蚴在移行中表现出对肝脏的趋向性,而亚洲带绦虫仅仅定植于肝脏,引起肝脏的损害。从而提出肝脏囊虫病的概念,作者还进一步用猪带绦虫和亚洲带绦虫实验感染了灵长类动物猕猴,证明猪带绦虫囊尾蚴可寄生于猕猴的肝脏并引起肝脏损害。
