本课题拟构建携带eGFP荧光标记基因的新型慢病毒载体，转染大段骨缺损周围的组织细胞；构建携带RFP荧光标记基因的新型慢病毒载体, 转染种子细胞（骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞）。通过双荧光基因的长期稳定表达，使骨缺损周围的组织细胞和生物支架材料所负载的种子细胞分别带有不同的荧光标记。采用显微外科技术原位构建带血管神经束的组织工程骨。通过eGFP和RFP双荧光长期体内示踪，观察两组荧光细胞的生长、迁移、分化和相互作用等。分析研究组织工程骨成骨过程中，血管与神经生长的动态变化并检测相关的量性指标。在此过程中，利用组织学、分子生物学、荧光活体成像和核磁共振等多种方法，分析比较血管神经化组织工程骨中新生组织的来源，深入揭示组织工程骨构建中，血管与神经再生的机制，为构建有活力的组织工程骨并应用于临床大段骨缺损的修复奠定理论基础。

本课题构建携带eGFP荧光标记基因的新型慢病毒载体，转染大段骨缺损周围的组织细胞；构建携带RFP荧光标记基因的新型慢病毒载体, 转染种子细胞（骨髓间充质干细胞）。通过双荧光基因的长期稳定表达，使骨缺损周围的组织细胞和生物支架材料所负载的种子细胞分别带有不同的荧光标记。采用显微外科技术原位构建带血管神经束的组织工程骨。通过eGFP和RFP双荧光长期体内示踪，观察两组荧光细胞的生长、迁移、分化和相互作用等。分析研究组织工程骨成骨过程中，血管与神经生长的动态变化并检测相关的量性指标。在此过程中，利用组织学、分子生物学、荧光定量PCR等多种方法，分析比较血管神经化组织工程骨中新生组织的来源，深入揭示组织工程骨构建中，血管与神经再生的机制，为构建有活力的组织工程骨并应用于临床大段骨缺损的修复奠定理论基础。