子宫颈癌是危害广大妇女健康最常见的恶性肿瘤之一，我国每年新发病例有13.5万，约5万妇女死于宫颈癌。近年来发现，年轻妇女中子宫颈癌的发病率呈现上升趋势，占所有患者的 10%，已引起人们的广泛关注。本课题将构建成功的带有HPV16 E6/E7基因的重组腺病毒载体转染树突状细胞，研究其对CaSki细胞的生长抑制作用和诱导调亡作用，具体包括：采用流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞增殖曲线、Annexin V-FITC/PI 双标记法检测细胞早期凋亡、Western blot检测P53蛋白表达情况。采用比较蛋白质组学方法寻找处理前后的差异表达蛋白。同时，将重组腺病毒载体转染后的树突状细胞通过皮下注射子宫颈癌动物模型，检测其对子宫颈癌的治疗作用。综合以上结果，探讨其作用机制。该研究成果将为预防和治疗子宫颈癌提供新的理论和实验依据，具有潜在的经济效益和社会效益。

本研究采用重组腺病毒载体感染小鼠未成熟树突状细胞，制备DC疫苗，在细胞水平及动物模型中研究其对CaSki细胞的杀伤作用，为研究宫颈癌的免疫治疗提供依据。1.重组载体pAd-E6E7转染体外培养的小鼠未成熟树突状细胞，经激光共聚焦显微镜、流式细胞术、Western blot检测，证明E6E7能有效表达。2.分别将pAd-E6E7转染、CaSki细胞裂解物负载的DC，诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞，观察DC疫苗对CaSki细胞的杀伤效应。结果表明前者具有显著的诱导CTLs杀伤CaSki细胞的作用。3.将pAd-E6/E7感染DC，通过FCM检测表面标志物、Western blot检测E6蛋白、CCK8法检测T淋巴细胞的增殖及其杀伤效应，结果表明DC疫苗能够促进小鼠体内T淋巴细胞的增殖，对CaSki细胞有较明显的杀伤作用。4.未成熟DC表达的蛋白质用2-DE分离得到了约660个蛋白点，获得了87个蛋白点的PMF图，利用MS-Fit工具收索，鉴定。其中与免疫调节功能相关的蛋白质有40个，与大分子代谢相关的有37个。5.HSP70 siRNA可以有效抑制HeLa细胞增殖，促进其凋亡。