玫瑰黄链霉菌（Streptomyces roseoflavus）Men-myco-93-63是本实验室从马铃薯疮痂病自然衰退土壤中独立分离获得的一株生防链霉菌，前期研究表明该生防菌及其发酵液对棉花黄萎病菌、瓜类白粉病菌等多种生产上重要的植物病原菌都具有很强的拮抗作用，并且田间防效良好。本项目拟在前期工作的础上进一步完善和建立菌株Men-myco-93-63基于不同质粒的接合转移转化体系，根据已报道的链霉菌的正、负调控序列设计引物，扩增Men-myco-93-63基因组，明确Men-myco-93-63菌株中调控序列的存在情况，并通过基因阻断和转化试验来验证这些序列在该菌株中的功能，为探明生防菌的代谢途径及实现生防菌的遗传改良奠定重要的基础。

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 是分离自马铃薯疮痂病自然衰退土壤中的一株拮抗菌。该菌株及其发酵液对棉花黄萎病菌、瓜类白粉病菌等多种重要的植物病原菌具有很强的抑制作用，有着良好的生防应用潜力。本研究建立了该生防菌的接合转移转化体系，并且进一步优化了接合转移条件，获得了较好的转化效果。根据天蓝色链霉菌 A3(2) 的nsdA负调控基因序列设计引物，扩增玫瑰黄链霉菌 Men-myco-93-63 基因组DNA，克隆得到编码 369 个氨基酸的全长序列，命名为nsdAmgh基因，并用斑点杂交法进行了验证。利用基因破坏型质粒构建同源重组质粒pSRNA2500(pKC1139::1.5 kb nsdAmgh ::1.0 kb KmR)阻断该负调控基因，得到基因中断突变株，并用斑点杂交法验证了突变株中的nsdAmgh基因已被正确中断。与出发菌株相比，突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。nsdAmgh负调控基因的克隆为探明玫瑰黄链霉菌的代谢途径及实现该生防菌的遗传改良奠定了重要的基础。