在成功构建猪瘟病毒全长感染性cDNA克隆基础上，采用体外遗传操作技术，构建Erns和Npro双基因缺失突变体全长感染性cDNA克隆，体外转录RNA，转染PK15细胞恢复出重组病毒。用该重组病毒感染PK15细胞和持续表达Erns的PK15反式互补细胞系，研究Erns和Npro在抑制dsRNA和异源病毒(Sendai病毒)诱导IFN -α/β生成中的作用；采用荧光素酶基因报道系统，研究Erns和Npro对IRF3、NF-κB、ISRE和VISA等IFN-α/β表达调控因子转录激活的调节。用重组病毒接种猪，研究Erns和Npro双基因缺失重组病毒的毒力、致病性和诱导的免疫保护效力等生物学特性。从细胞和机体水平揭示Erns和Npro在CSFV致病中的作用及其分子机理，探讨Erns和Npro双基因缺失用于构建新型基因工程疫苗的可能性，为猪瘟防制提供新的理论依据和技术支撑。

猪瘟病毒(CSFV)是引起猪的高度致死性烈性传染病- - 猪瘟的病原体。揭示病毒逃逸宿主细胞抗病毒免疫的分子机制和病毒相关蛋白的功能是CSFV研究的前沿领域。通过本课题的实施，获得了以下主要成果。研究证实，CSFV编码的Npro和Erns对dsRNA诱导的I型干扰素(IFN-β)生成具有抑制作用，Erns以剂量依赖的方式、通过与dsRNA结合进而抑制dsRNA诱导的IFN-β生成，Erns抑制IFN-β的生成不依赖其毒力相关的RNase活性。Erns的糖基化是其结合dsRNA和抑制IFN-β生成所必需；研究还证实，Npro和Erns对dsRNA诱导IFN-β生成的抑制无协同或拮抗效应。NS3和NS5B蛋白功能研究发现，NS3具有RNA刺激的NTP酶和RNA解旋酶活性。NS3在体外沿着模板链3′到5′方向解旋具有3′突出端的双链RNA。NS5B通过与NS3相互作用，特异性增强NS3的NTP酶和NS3解旋酶结构域的解旋酶活性。这些结果加深了对CSFV致病分子机理的认识；为开发猪瘟预防控制新技术和进一步研究病毒基因组复制及调控机理奠定了基础。