中文摘要
促性腺激素释放激素(GnRH)在脊椎动物生殖活动中起着关键的调节作用,一直是生殖生物学和发育生物学的研究热点之一。在脊椎动物体内存在多种类型的GnRH,但有关它们确切的生理意义目前并不清楚。由于黄鳝具有自然性逆转这一独特的繁殖生物学特征,黄鳝GnRH系统的结构和功能值得深入研究。在克隆了黄鳝三种类型GnRH全长cDNA的基础上,将应用原位杂交和免疫组织化学技术研究黄鳝三种GnRH神经元和神经纤维的分布及变化规律;克隆和鉴定黄鳝三种GnRH不同剪接形式的mRNA,研究其表达规律及内含子对转录后翻译的影响;采用在体和离体实验研究黄鳝三种GnRH对垂体GtH I和GtH II基因表达的调节,比较这三种GnRH对黄鳝性逆转和性腺活动的调节作用,以期较系统地揭示黄鳝三种GnRH系统表达特征及其对生殖内分泌的调控作用,为揭示黄鳝性逆转的机制奠定基础,为阐明脊椎动物GnRH系统的功能提供新的资料。
结题摘要
pjGnRH和sGnRH神经元主要分布在视前下丘脑区,其神经纤维投射到垂体;首次在嗅球腹部、嗅球和端脑交叉处腹部发现cGnRH-II神经核团。黄鳝三种GnRH基因结构和其它脊椎动物相似,且存在多种剪切形式。黄鳝卵巢发育过程中,下丘脑pjGnRH和sGnRH,及垂体GtHI和GtHIIβ表达明显升高;在性逆转过程中,下丘脑和垂体pjGnRH表达升高,而下丘脑和垂体sGnRH表达明显下降, GtHI和GtHIIβ表达降低;性腺中三种GnRH表达在性逆转早期明显升高。结果表明GnRH可能同时在垂体和性腺水平调控性逆转过程。克隆黄鳝两种GnRH受体,GnRH-RI在垂体和性腺表达较高;GnRH-RII在脑部表达较高。垂体GnRH-RI表达在卵巢发育过程中显著升高,性腺中两种GnRH-R表达在性逆转早期均显著升高。体外孵育实验表明:pjGnRH和sGnRH可提高垂体中脑芳香化酶基因表达,GtH可提高卵巢中性腺芳香化酶基因表达水平。克隆了三种无脊椎动物GnRH基因,其GnRH均为12肽,基因结构和脊椎动物的相似。以上研究结果为进一步阐明GnRH在黄鳝及其它动物生殖活动中的作用及机制奠定了基础。
