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控制ZmGLU1基因表达关键转录因子的克隆和功能分析

控制ZmGLU1基因表达关键转录因子的克隆和功能分析
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  • 批准号:30700134
  • 批准年度: 2007年
  • 学科分类:分子相互作用(C050102) |
  • 项目负责人:顾日良
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:中国农业大学
  • 资助金额:17万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2008年01月01日 至 2010年12月31日
  • 中文关键词: ZmGLU1;基因表达;转录;因子;克隆
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

细胞分裂素促进细胞分裂与分化,在植物生长发育、形态建成和各种生理生化活动过程中起着非常重要的作用。植物体内活性细胞分裂素水平受到严格调控,束缚态细胞分裂素的活化是其中最重要的一个调控过程,直接控制着体内活性细胞分裂素的水平。玉米体内束缚态细胞分裂素的活化是由β-葡萄糖苷酶(ZmGLU1)催化的,此酶的含量直接影响着活性细胞分裂素的水平,但β-葡萄糖苷酶的含量是如何调控的尚不清楚。本小组前期工作中发现ZmGlU1基因启动子上存在控制此基因组织特异性表达的顺式元件,并将该元件定位在40bp序列上,通过凝胶阻滞分析发现存在与该元件特异结合的转录因子;同时发现ZmGLU1启动子上存在细胞分裂素反馈调节元件,并将该元件定位到215bp序列中。为此,本研究拟继续精确定位反馈调节元件,再以酵母单杂的方法克隆控制ZmGLU1组织特异表达和细胞分裂素反馈调节表达的转录因子,并阐明其调控机制。

结题摘要

细胞分裂素促进细胞分裂与分化,在植物生长发育和各种生理生化活动过程中起着非常重要的作用。植物体内活性细胞分裂素水平受到严格调控,β-葡萄糖苷酶(ZmGLU1)催化束缚态细胞分裂素的活化是其中的关键步骤之一。ZmGLU1基因属于糖基水解酶1(GH1)家族成员,本研究发现ZmGLU1基因在GH基因家族的一个独立进化分支上,并且含有一个识别和结合细胞分裂素的特异结构域DDAYA。基因表达研究发现ZmGlU1基因在玉米根中特异表达,启动子活性分析发现转录水平控制了ZmGLU1的根特异表达。通过启动子缺失和融合实验,从ZmGLU1启动子上分离到一个40 bp长的顺式元件(T40)控制此基因在根中特异表达。进一步通过凝胶阻滞分析发现存在与T40特异结合的蛋白,并且不同器官中该蛋白的丰度与ZmGLU1基因的表达丰度呈负相关性,由此证明T40是一个负调控元件,通过与一未知蛋白的结合来阻遏ZmGLU1基因在根以外的器官中表达,实现根特异表达特性。

评估说明

    国家自然科学基金项目“控制ZmGLU1基因表达关键转录因子的克隆和功能分析”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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