中文摘要
HYL1和REV是两个与叶近远轴极性建立有关的基因。为了阐述叶极性建立和叶卷曲的分子机制，本项目将HYL1基因、miR165/166和REV等基因及其表达产物所组成的生物反应体系作为一个动态的基因表达系统，主要进行相关突变体叶极性改变及叶卷曲的表型分析、目标基因的表达分析、基因相互关系的遗传分析以及整个基因表达系统的组成分析，了解主要基因的表达规律及其调控机制，掌握叶极性和卷曲性状的遗传规律，明确
结题摘要
HYL1和REV是两个与叶近远轴极性建立相关的基因，为了阐述叶极性建立和叶卷曲的分子机制，我们用不同手段对HYL1进行了研究。HYL1是拟南芥miRNA生物合成过程中的重要蛋白，它有两个双链RNA结合结构域（dsRBDs)，一个核定位信号（NLS）和一个蛋白蛋白相互作用结构域（PPI）。在植物中HYL1和DCL1两个蛋白的相互作用对于miRNA初级转录本的精确有效剪切是十分重要的。为了确定HYL1的不同结构域对于miRNA的的生物合成以及miRNA所调控的突变体的表型，我们构建了一系列HYL1不同结构域的载体，通过转基因的方法，转入HYL1的缺失突变体中。我们发现HYL1前两个dsRBDs能完全恢复hyl1突变体的表型，引起了miR166和miR160的积累，并且同时降低了mRNA靶基因的水平。通过体内一系列的生化实验分析表明，只有HYL1前两个dsRBDs具有剪切pre-miRNA并最终形成成熟的miRNA。瞬时表达实验结果分析表明NLS确实是核定位信号，因此我们认为HYL1前两个dsRBD结构域能够起到和HYL1全长蛋白相同的功能并对miRNA介导的靶基因的沉默有十分重要的作用。