热休克反应对全身性炎症反应综合征(SIRS)具有明显抑制作用,前期研究发现热休克因子1(HSF1)参与了多数烧伤炎症介质基因的表达调控,本课题拟采用大鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,在烧伤血清干扰下，观察HSF1基因被抑制、活化和过表达对最重要的烧伤炎症介质TNF-α、高迁移率族蛋白-1(HMGB1)及IL-10基因表达的调控作用；并运用凝胶滞留实验确定HSF1与HSE的结合，同时构建相应启动子的报告质粒，与HSF1和/或NF-κB、AP-1、CREB、AP-2、SP-1及NF-IL6等炎症相关转录因子表达质粒共转染，在烧伤血清干扰下，观察HSF1与TNF-α、HMGB1、IL-10基因启动子区HSE的结合及HSF1与炎症相关转录因子的相互作用及其对TNF-α、HMGB1、IL-10基因转录的影响。以期从HSF1水平揭示烧伤炎症反应中的细胞内源性分子保护机制,开创烧伤抗炎研究新思路和新途径。

目的：探讨热休克转录因子1(HSF1)在烧伤后炎症基因调控中的作用及机制。方法：采用大鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,在烧伤血清干扰下，通过构建HSF1及NF-κB表达质粒从而实现其在细胞中的高表达，并构建最重要的烧伤炎症介质基因——TNF-α、高迁移率族蛋白-1(HMGB1)及IL-10的报告质粒，脂质体联合共转染巨噬细胞，再采用双荧光素酶活性检测验证基因的活性变化。结果：烧伤血清能诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7的TNF-α、HMGB1、IL-10的分泌增加；而热休克反应能明显降低TNF-α、HMGB1、IL-10的分泌。过表达HSF1能抑制烧伤血清诱导RAW264.7细胞HMGB1的释放和TNFα mRNA的表达，上调IL-10mRNA的表达。HSE核心结合位点突变后，TNF-α、HMGB1、IL-10的相对萤光素酶活性突变体相对野生型均下降，P值＜0.01。结论：HSF1是热休克反应的重要转录因子，可以直接调控与多种炎症因子的启动子区结合发挥调控作用，也可能与NF-κB相互作用而发挥作用。