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与绵羊种布鲁氏菌019株表面蛋白VirB2、VirB5互作的绵羊巨噬细胞捕获蛋白功能研究

与绵羊种布鲁氏菌019株表面蛋白VirB2、VirB5互作的绵羊巨噬细胞捕获蛋白功能研究
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  • 批准号:30800813
  • 批准年度: 2008年
  • 学科分类:兽医病理学(C180103) |
  • 项目负责人:王远志
  • 负责人职称:教授
  • 依托单位:石河子大学
  • 资助金额:18万元
  • 项目类别:青年科学基金项目
  • 研究期限:2009年01月01日 至 2011年12月31日
  • 中文关键词: 布鲁氏菌;蛋白;VirB2、VirB5;巨噬细胞;捕获
  • 英文关键词:暂无数据

项目摘要

中文摘要

绵羊种布鲁氏菌019株是我国最早分离、鉴定的绵羊附睾型布鲁氏菌。在国家自然基金的支持下,前期已用酵母双杂交方法获得与019株VirB2、VirB5表面蛋白作用的捕获蛋白。本研究拟采用免疫共沉淀方法准确验证绵羊种布鲁氏菌019株VirB2、VirB5表面蛋白与巨噬细胞捕获蛋白的相互作用,随后针对捕获蛋白cDNA序列,设计RNA干扰片段,构建RNA干扰质粒,转染绵羊巨噬细胞,用绵羊种布鲁氏菌019株侵染转染后的绵羊巨噬细胞,考察这些捕获蛋白在布鲁氏菌侵染过程中的功能,为进一步揭示布鲁氏菌胞内寄生的分子机理和布鲁氏菌病药物靶点的选择提供科学依据。

结题摘要

通过Co-IP得出:绵羊种布鲁氏菌VirB2、VirB5、OMP31与巨噬细胞蛋白趋化因子配体2 (CXCL2)、含铁素重链多肽(FTH1)、特异性乳糖苷凝集素(GSL)有相互作用;RNA干扰、荧光实时定量PCR、扫描电镜、ELISA细胞因子检测等实验表明:FTH1表达受阻抑制了布鲁氏菌对巨噬细胞的入侵和胞内寄生,并促进感染细胞的凋亡进程;GSL基因表达抑制,布鲁氏菌胞感染能力增强,导致感染细胞的坏死程度加快;敲除布鲁氏菌VirB2后,,布鲁氏菌的毒力降低,刺激机体分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10和TNF-α的能力低于亲本株。在本项目的资助下,共培养了3个研究生,有1名学生评为石河子大学优秀毕业生,有1篇硕士研究论文为石河子大学优秀论文,标注有国家自然科学基金(编号:30800813)发表的论文8篇,收录2篇,其中包括4篇中文核心期刊,1篇SCI文章,超额完成本项目预期的任务。

评估说明

    国家自然科学基金项目“与绵羊种布鲁氏菌019株表面蛋白VirB2、VirB5互作的绵羊巨噬细胞捕获蛋白功能研究”发布于爱科学iikx,并永久归类于相关科学基金导航中,仅供广大科研工作者查询、学习、选题参考。国科金是根据国家发展科学技术的方针、政策和规划,以及科学技术发展方向,面向全国资助基础研究和应用研究,发挥着促进我国基础研究源头创新的作用。国科金的真正价值在于它能否为科学进步和社会发展带来积极的影响。

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