中文摘要
纽约大学医学院Skirball研究所王大能教授实验室是一个专门研究膜蛋白结构和功能的实验室,多年来一直从事膜蛋白的表达、分离纯化、结晶化、结构解析、功能分析的研究。王大能博士是国际膜蛋白结构研究领域内的专家,曾参与国际上用电子晶体学方法测定了植物捕光蛋白复合体的高分辨率三维空间结构(Nature, 1991, Vol350:130-134;Nature, 1994, Vol367:614-621)。最近,王大能教授实验室又用X射线晶体学在甘油-3-磷酸转运蛋白的结构解析研究方面取得突破(Science, 2003, Vol301:616-620)。迄今已发表SCI论文40多篇,引用次数超过1000多次。申请者已帮助国内合作实验室建立了完整的CorA膜蛋白表达、纯化和脂质体重组活性测定系统。本研究将在此基础上利用包括电子显微学技术在内的各种方法对CorA转运动力学、结构功能进行深入研究。
结题摘要
Mg2+是生命必须的二价阳离子之一,CorA是第一个克隆得到的Mg2+转运蛋白基因,是维持原核生物细胞内Mg2+平衡最为重要的Mg2+转运系统之一,其同源基因广泛分布于细菌,真菌,植物和动物体内,形成了庞大的CorA转运体家族。本项目在国内建立了完整的大肠杆菌CorA 膜蛋白表达、纯化和脂质体重组活性测定系统,利用电子显微学技术并结合生物化学和分子生物学等方法对大肠杆菌CorA的结构与功能进行深入研究。初步揭示了CorA蛋白C末端氨基酸序列对于转运的重要性,利用化学交联以及电子显微学的方法对大肠杆菌CorA的寡聚结构做了初步研究。
