中文摘要
腺病毒相关病毒(AAV)是目前基因治疗中应用最广泛的一种病毒载体, 具有易制备,无致癌和致突变等优势,已被用于基因移植治疗心肌缺血或心力衰竭。该方法治疗中关键是AAV的有效种植和转染。目前多采用经导管冠状动脉、静脉注射和开胸心肌直接注射的方法实现AAV的心肌种植,有创且转染率均较低。新近的研究发现由超声微泡造影剂携带基因在超声波的作用下可实现定位爆破造影剂,靶向释放药物和基因载体从而达到对病变组织的无创靶向治疗目的。在此过程中, 微泡作为空化核产生空化效应,进入血管壁甚至组织间隙,可以明显提高局部组织细胞的基因转染。本研究的目的旨在将超声微泡造影剂作为携带AAV的介质,经周围静脉注射至心肌微循环后,给予超声定向爆破,从而增强AAV载体的心肌靶向基因种植的转染率,为AAV心肌种植摸索出一条无创、高效的方法。
结题摘要
目的:探讨超声造影剂介导标记有GFP基因的重组腺相关病毒载体(rAAV2-EGFP)在心肌内的靶向种植效果。方法:健康成年SD大鼠随机分为六组:①尾静脉注射超声造影剂+超声照射破坏微泡组;②单纯 rAAV2-EGFP注射(不予超声照射组);③注射rAAV2-EGFP+超声照射组;④超声破坏造影剂微泡后注射rAAV2-EGFP组;⑤造影剂携带rAAV2-EGFP注射(不予超声照射)组;⑥造影剂携带rAAV2-EGFP+超声照射组。转基因后14天行心肌、肝脏、脑组织冰冻切片,荧光显微镜下观察GFP的表达情况。结果:造影剂携带rAAV-EGFP同时给予超声照射组心肌内GFP的表达量最多(p<0.01)。结论:超声及超声造影剂介导下同时在体表心脏部位进行定点爆破可以高效地促进腺相关病毒在心肌内的靶向种植。
